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北化方華鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
加了酶切位點和保護堿基的引物Tm值計算及PCR問題。急急急 已有7人參與
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加了酶切位點和保護堿基后tm值增加了30度，本身引物就50度了，而且長度很短15bp左右，做過各種梯度和分布PCR，P出來的時候很少很少，加了GCbuffer或者DMSO后也沒P出來，跑膠都是非特性性條帶，一大條的涂帶那種，現(xiàn)在想試下touch down，不知道用哪個Tm值設(shè)置，好憂傷。 |
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