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[求助]
做MTT，有兩個濃度，八個孔當(dāng)時就變色了，什么原因？ 已有2人參與
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細胞：HCT--116 細胞數(shù)量：每孔5000個 藥物作用時間48h 剛剛加了MTT 加藥孔中有兩個較大的濃度，共八個孔，在加過MTT后直接變色了 其它濃度沒有變色 MTT加完，放到顯微鏡看，發(fā)現(xiàn)這幾個孔背景變暗， 可以排除藥物被污染，其它濃度的沒問題 最大濃度和這兩個濃度之間的一個濃度都沒有變化 正在等MTT最后結(jié)果 另外：MTT結(jié)果跟細胞數(shù)量有沒有必然聯(lián)系，剛剛老板說細胞數(shù)沒有不同，MTT做就沒意義了，我很不同意 |
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加入MTT后立刻變色： 1 細菌污染，細菌沒有細胞膜，MTT立刻進入細菌與酶反應(yīng)。 2 藥物與MTT反應(yīng)，MTT是還原性的，如果藥物強氧化性，也會立刻反應(yīng)的。 根據(jù)樓主的描述，加過MTT后直接變色了，MTT加完，放到顯微鏡看，發(fā)現(xiàn)這幾個孔背景變暗，是細菌污染的可能性很大，而且是很嚴重的污染。 |
3樓2014-08-17 16:35:05
璧月
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5樓2014-08-18 10:08:43
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7樓2015-05-29 14:03:25
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