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做MTT，有兩個濃度，八個孔當(dāng)時就變色了，什么原因？ 已有2人參與
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細(xì)胞：HCT--116 細(xì)胞數(shù)量：每孔5000個 藥物作用時間48h 剛剛加了MTT 加藥孔中有兩個較大的濃度，共八個孔，在加過MTT后直接變色了 其它濃度沒有變色 MTT加完，放到顯微鏡看，發(fā)現(xiàn)這幾個孔背景變暗， 可以排除藥物被污染，其它濃度的沒問題 最大濃度和這兩個濃度之間的一個濃度都沒有變化 正在等MTT最后結(jié)果 另外：MTT結(jié)果跟細(xì)胞數(shù)量有沒有必然聯(lián)系，剛剛老板說細(xì)胞數(shù)沒有不同，MTT做就沒意義了，我很不同意 |
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沙伯略
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【答案】應(yīng)助回帖
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加入MTT后立刻變色： 1 細(xì)菌污染，細(xì)菌沒有細(xì)胞膜，MTT立刻進(jìn)入細(xì)菌與酶反應(yīng)。 2 藥物與MTT反應(yīng)，MTT是還原性的，如果藥物強(qiáng)氧化性，也會立刻反應(yīng)的。 根據(jù)樓主的描述，加過MTT后直接變色了，MTT加完，放到顯微鏡看，發(fā)現(xiàn)這幾個孔背景變暗，是細(xì)菌污染的可能性很大，而且是很嚴(yán)重的污染。 |
3樓2014-08-17 16:35:05
璧月
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5樓2014-08-18 10:08:43
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7樓2015-05-29 14:03:25
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