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璧月捐助貴賓 (正式寫(xiě)手)
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[求助]
做MTT，有兩個(gè)濃度，八個(gè)孔當(dāng)時(shí)就變色了，什么原因？ 已有2人參與
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細(xì)胞：HCT--116 細(xì)胞數(shù)量：每孔5000個(gè) 藥物作用時(shí)間48h 剛剛加了MTT 加藥孔中有兩個(gè)較大的濃度，共八個(gè)孔，在加過(guò)MTT后直接變色了 其它濃度沒(méi)有變色 MTT加完，放到顯微鏡看，發(fā)現(xiàn)這幾個(gè)孔背景變暗， 可以排除藥物被污染，其它濃度的沒(méi)問(wèn)題 最大濃度和這兩個(gè)濃度之間的一個(gè)濃度都沒(méi)有變化 正在等MTT最后結(jié)果 另外：MTT結(jié)果跟細(xì)胞數(shù)量有沒(méi)有必然聯(lián)系，剛剛老板說(shuō)細(xì)胞數(shù)沒(méi)有不同，MTT做就沒(méi)意義了，我很不同意 |
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大叔小笨蛋
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7樓2015-05-29 14:03:25
沙伯略
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2樓2014-08-17 16:06:38
yqbter
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
youlinglyw: 金幣+2 2014-08-17 18:26:20
璧月: 金幣+5, ★★★★★最佳答案, 回答非常詳細(xì)，我現(xiàn)在還是窮人，只有五分了 2014-08-19 17:50:00
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璧月: 金幣+5, ★★★★★最佳答案, 回答非常詳細(xì)，我現(xiàn)在還是窮人，只有五分了 2014-08-19 17:50:00
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加入MTT后立刻變色： 1 細(xì)菌污染，細(xì)菌沒(méi)有細(xì)胞膜，MTT立刻進(jìn)入細(xì)菌與酶反應(yīng)。 2 藥物與MTT反應(yīng)，MTT是還原性的，如果藥物強(qiáng)氧化性，也會(huì)立刻反應(yīng)的。 根據(jù)樓主的描述，加過(guò)MTT后直接變色了，MTT加完，放到顯微鏡看，發(fā)現(xiàn)這幾個(gè)孔背景變暗，是細(xì)菌污染的可能性很大，而且是很嚴(yán)重的污染。 |
3樓2014-08-17 16:35:05
璧月
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4樓2014-08-17 18:02:12
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