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[求助]
請(qǐng)教各位師兄師姐，蛋白電泳出問(wèn)題了 已有3人參與
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小弟最近在純化蛋白，并用SDS-PAGE電泳檢測(cè)。先前跑的電泳還算正常，條帶都是從分離膠交界處那開(kāi)始分離，但最近幾次跑的電泳都莫名其妙的到中間才開(kāi)始分離，而且感覺(jué)不少蛋白都沉積在一起，跑最下面去了分不開(kāi)。請(qǐng)教各位師兄師姐，有沒(méi)有出現(xiàn)過(guò)類似的情況，這是什么地方出問(wèn)題了還望告知小弟。 20140527205706.jpg |
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clj881128
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zero19871029
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【答案】應(yīng)助回帖
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跑膠時(shí)電壓的情況是怎么樣的，跑濃縮膠的時(shí)候電壓可以適當(dāng)調(diào)低一點(diǎn)，等到marker差不多能夠分清楚時(shí)（我們用的是thermo的預(yù)染marker，能夠看到紅色條帶時(shí)就算分開(kāi)了）就可以加電壓了，這樣跑出來(lái)的條帶比較好看。 另外就是你的分離膠的問(wèn)題，是不是pH或者濃度跟之前不太一樣，此外分離不同大小的蛋白時(shí)用的濃度也是不一樣的 |
2樓2014-08-18 11:34:44
clj881128
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