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PCR退火溫度為什么要設(shè)置程序升溫？ 已有3人參與
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| 最近做PCR，文獻中的PCR條件中退火溫度是50~60°C，1min，很不明白這個溫度條件是什么意思，在PCR儀上要怎么設(shè)定？ |
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 核酸生物學(xué)實驗經(jīng)驗 |
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ksws0465326
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
8樓2014-08-19 21:16:25
ksws0465326
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
淡水三年: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-08-19 19:34:46
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
淡水三年: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-08-19 19:34:46
| 是退火溫度梯度實驗吧，同一個體系下，不同的退火溫度，可能會有不同的結(jié)果條帶，看在哪個溫度下擴增的最好，條帶清晰單一，在合成一個新的質(zhì)粒或基因組插入片段之類的，有時會應(yīng)用到退火溫度梯度實驗，和引物濃度梯度，模板濃度梯度等等，根據(jù)實際情況而定。至于怎么設(shè)定，有可以做這個的PCR儀，設(shè)置一個最低退火溫度，和一個最高的退火溫度，每一個豎排都是一個溫度，把樣品放入你想用的溫度里就行，如果沒有這種PCR儀，只能多用幾臺PCR儀了，每臺設(shè)定不同的退火溫度進行試驗。希望對你有所幫助。 |
2樓2014-08-18 20:17:05
3樓2014-08-18 22:38:23
4樓2014-08-19 07:57:11
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