 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2223 | 回復(fù): 9 | |||
[求助]
走過路過的大俠幫忙啊-----重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化后抽提質(zhì)粒濃度低 已有3人參與
|
| 請(qǐng)問各位大俠，我將目的片段和載體，雙酶切（快切）20min，跑膠檢驗(yàn)沒問題后連接轉(zhuǎn)化，然后挑取一些菌株活化抽提質(zhì)粒，檢測(cè)出來質(zhì)粒濃度20-30ng/ul,不知道是為什么，請(qǐng)各位走過路過的大俠指點(diǎn)迷津�。。。。。�！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
306求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料學(xué)學(xué)碩337求調(diào)劑-一志愿華中科技大學(xué)
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
313求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境總分308求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
南昌大學(xué)材料專碩311分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
316求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
346求調(diào)劑[0856]
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級(jí)已過 本科山東雙非 求調(diào)劑！
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
310求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- PYD1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化釀酒酵母后為什么長(zhǎng)出的陽(yáng)性斑PCR擴(kuò)不出目的片段？
已經(jīng)有97人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒 轉(zhuǎn)化 植物愈傷組織
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入BL21后，平板可以長(zhǎng)，但挑單克隆菌搖不起來
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 酵母重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化酵母后，長(zhǎng)出的斑有大有小
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒構(gòu)建 連接轉(zhuǎn)化效率低 求幫助啊
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 菌落PCR有目的條帶，重組質(zhì)粒提取PCR卻沒條帶，請(qǐng)問是什么原因？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒提取，結(jié)果提取片段跑膠 比實(shí)際還大，請(qǐng)各位大俠給指點(diǎn)一下
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 連接效率低，重組質(zhì)粒無(wú)法酶切
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒，搖菌提取質(zhì)粒后，如何測(cè)序？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 新人，請(qǐng)大俠賜教：構(gòu)建重組質(zhì)粒選擇雙酶切還是單酶切？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- pPICZαC質(zhì)粒抽提濃度低
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 提取重組質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切之后什么條帶也沒有，怎么回事？？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化之前需要酶切驗(yàn)證嗎
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 農(nóng)桿菌如何幫助重組質(zhì)粒整合到植物染色體上？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化，板子上總長(zhǎng)雜菌
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 原核表達(dá)重組質(zhì)粒提取
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 求助：重組質(zhì)粒酶切問題！請(qǐng)大家?guī)臀医鉀Q一下，急！
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 十萬(wàn)火急，重組質(zhì)粒酶切只有一條帶，測(cè)序有結(jié)果，但反復(fù)說我質(zhì)粒濃度很低
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】試劑盒提取重組質(zhì)粒的A260/A280=2.08,求幫忙分析一下
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】我用菌液搖菌抽提質(zhì)粒濃度很低，請(qǐng)大家?guī)兔鉀Q下，為什么
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有22人回復(fù)
youlinglyw
榮譽(yù)版主 (著名寫手)
一匡天下
-
專家經(jīng)驗(yàn): +37 - BioEPI: 5
- 應(yīng)助: 136 (高中生)
- 貴賓: 0.077
- 金幣: 8052.9
- 散金: 8858
- 紅花: 208
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 1511
- 在線: 263.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 787036
- 注冊(cè): 2009-06-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 認(rèn)知科學(xué)
- 管轄: 生物科學(xué)
2樓2014-09-16 21:09:23
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
你這個(gè)問題可以從兩方面來考慮： 首先，不知道樓主有沒有檢測(cè)抽提出來的質(zhì)粒是否為所需的質(zhì)粒（可以PCR鑒定和酶切鑒定），如果是，那么說明之前的酶切、連接、轉(zhuǎn)化是沒有問題的，那么問題就出來抽提質(zhì)粒上，可能的原因有兩個(gè)，一是菌的問題，即濃度太低或者或者質(zhì)粒兼容性不好，前者解決辦法就是加長(zhǎng)搖菌時(shí)間，后者解決辦法就是換感受態(tài)菌株，重新轉(zhuǎn)化； 第二，如果檢測(cè)結(jié)果表明所抽提核酸（可能是混進(jìn)的菌株基因組DNA或者RNA）不是所需質(zhì)粒，那么問題就在酶切、連接、轉(zhuǎn)化上了，建議逐一排查各步可能出現(xiàn)的問題，方法就是加進(jìn)陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照。 個(gè)人見解，僅供參考 |
3樓2014-09-16 22:12:46
4樓2014-09-17 08:56:50
5樓2014-09-17 08:59:37
6樓2014-09-17 21:40:10
7樓2014-09-18 09:52:07
gongeleven
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 55 (初中生)
- 金幣: 7107.8
- 散金: 222
- 紅花: 3
- 帖子: 432
- 在線: 152.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 1082982
- 注冊(cè): 2010-08-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
8樓2014-09-18 22:41:04
9樓2014-09-19 08:15:44
10樓2014-09-22 10:45:10
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 馮英慧1101 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +9 | 梁梁校校 2026-03-17 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +9 | 戲精丹丹丹 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
[考研]
 271材料工程求調(diào)劑
+8
|
.6lL 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 【考研調(diào)劑】化學(xué)專業(yè) 281分，一志愿四川大學(xué)，誠(chéng)心求調(diào)劑 +8 | 吃吃吃才有意義 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，求調(diào)劑 +5 | 材化逐夢(mèng)人 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +10 | S.H1 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 +8 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料求調(diào)劑，總分315（英一） +5 | sbdksD 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩297已過四六級(jí)求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交通 專碩 材料355 本科雙非 求調(diào)劑 +5 | 西南交通專材355 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +22 | rare12345 2026-03-18 | 22/1100 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +4 | Stella_Yao 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級(jí)已過，有科研經(jīng)歷 +13 | 曦熙兮 2026-03-15 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 暗涌afhb 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +12 | 小熊joy 2026-03-14 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +5 | 上岸的小葡 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩274一志愿211求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個(gè)二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 東南大學(xué)364求調(diào)劑 +5 | JasonYuiui 2026-03-15 | 5/250 |
|