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為什么qpcr目的基因和內(nèi)參跑出來的膠不一樣亮 已有1人參與
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| 有一個疑問，既然目的基因和內(nèi)參都到了平臺期，為什么跑出來的條帶不一樣亮，我跑了39個循環(huán)，內(nèi)參15個循環(huán)到達(dá)指數(shù)期，目的基因25個循環(huán)到達(dá)指數(shù)期，但是他們都在39個循環(huán)之前到達(dá)了平臺期，且熒光強(qiáng)度一樣，那么為什么我跑膠的話，內(nèi)參條帶的亮度遠(yuǎn)大于目的基因？ |
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3樓2014-10-03 21:49:21
pennchem
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信息不夠全，我假設(shè)你用Taqman探針法， 在這樣的情況下，最終你檢測的信號不是PCR產(chǎn)物信號，而是探針?biāo)夂蟮男盘�，總的信號取決于你探針的總量。如果內(nèi)標(biāo)和目的探針濃度一樣，所以最終檢測信號一樣。盡管你內(nèi)參產(chǎn)物更濃，可是已經(jīng)沒有足夠多的探針來顯示了，飽和了。 按照你提供的信息，你的內(nèi)標(biāo)更早的達(dá)到飽和。 |
2樓2014-10-02 20:50:12
pennchem
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4樓2014-10-03 22:11:59
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