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littlefly1980新蟲 (初入文壇)
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[求助]
細(xì)菌熒光定量PCR的內(nèi)參 已有4人參與
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各位大俠: 我想在在做細(xì)菌的熒光定量PCR,染料法,以前很多文章中都用16SrRNA做內(nèi)參,可是我聽一個同事說現(xiàn)在用16SrRNA做內(nèi)參,國外的文章都不承認(rèn)?墒且约汉Y選內(nèi)參真的不容易,因?yàn)檫@個細(xì)菌的基因組序列不知道,只能根據(jù)相近的菌的基因組設(shè)計引物,又要再保守區(qū)設(shè)計,又要特異擴(kuò)增,真的不容易。我剛剛設(shè)計了幾對都沒成功! 請問 1.用16SrRNA做內(nèi)參,是不是真的國外的文章都不接受? 2.大家做細(xì)菌的熒光定量PCR都用什么做內(nèi)參? 3.都自己篩選內(nèi)參嗎? 萬分感謝! |
木蟲 (正式寫手)
歐巴
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1.用16SrRNA做內(nèi)參,是不是真的國外的文章都不接受? 這個不是絕對的,不過大多數(shù)的sci都不接受! 2.大家做細(xì)菌的熒光定量PCR都用什么做內(nèi)參? 內(nèi)參的選擇,有很多文獻(xiàn)都有提到的,中文的英文的都有,ldh這個應(yīng)該可以 3.都自己篩選內(nèi)參嗎? 有好的內(nèi)參就大家一起分享了,畢竟自己篩選太麻煩了,看到文獻(xiàn)里有提到的就拿來用就好了! |

新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
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可以用細(xì)菌的持家基因作為內(nèi)參嗎?銅綠acsA-F ACCTGGTGTACGCCTCGCTGAC acsA-R GACATAGATGCCCTGCCCCTTGAT aroE-F TGGGGCTATGACTGGAAACC aroE-R TAACCCGGTTTTGTGATTCCTACA guaA-F CGGCCTCGACGTGTGGATGA guaA-R GAACGCCTGGCTGGTCTTGTGGTA mutL-F CCAGATCGCCGCCGGTGAGGTG mutL-R CAGGGTGCCATAGAGGAAGTC nuoD-F ACCGCCACCCGTACTG nuoD-R TCTCGCCCATCTTGACCA ppsA-F GGTCGCTCGGTCAAGGTAGTGG ppsA-R GGGTTCTCTTCTTCCGGCTCGTAG trpE-F GCGGCCCAGGGTCGTGAG trpE-R CCCGGCGCTTGTTGATGGTT |
新蟲 (初入文壇)
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您好 我的是假單胞菌 您知道這個內(nèi)參的引物序列嗎?有沒有論文參考 做了好久了 ct值都偏大 25左右 跟目的基因差不多的ct值 求幫忙 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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