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s1g2k3

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[求助] 我想把兩個(gè)目的基因連接到一個(gè)質(zhì)粒上，然后進(jìn)行同源重組，讓兩個(gè)基因同時(shí)分開表達(dá) 已有5人參與

就是可以兩個(gè)基因連到一個(gè)質(zhì)粒，且表達(dá)相互不影響，說個(gè)名詞就可以，我就能查了，不知道該怎么查。

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【求助/交流】目的基因連接表達(dá)載體后涂板不長菌已經(jīng)有11人回復(fù)

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1樓 2014-10-21 09:37:52

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jian212

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s1g2k3: 金幣+3 2014-10-22 11:28:14

沒弄清楚你的目的？？你是要載體還是查文獻(xiàn)？？
載體的話PET-DUET-1就可以用

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學(xué)習(xí)再學(xué)習(xí)，努力再努力。

2樓2014-10-21 14:13:35

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小冀-

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s1g2k3: 金幣+3, ★★★很有幫助 2014-10-22 11:28:00

用含有雙啟動(dòng)子的質(zhì)粒就可以表達(dá)兩段基因，而且互不影響，比如說2樓說的PET-DUET-1共表達(dá)體系就可以用···

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3樓2014-10-21 14:25:36

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bolysu

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s1g2k3(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-10-24 20:58:48

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4樓2014-10-21 15:32:03

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圓yy

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倆個(gè)基因中間加一個(gè)link

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5樓2014-10-21 15:53:18

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我是要用絲狀真菌表達(dá)，需要同源重組，如果我這兩個(gè)基因查到一個(gè)基因里進(jìn)行同源重組，兩個(gè)能分別表達(dá)么？是不是需要各自都有啟動(dòng)子。

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6樓2014-10-22 11:27:06

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3樓: Originally posted by 小冀- at 2014-10-21 14:25:36
用含有雙啟動(dòng)子的質(zhì)粒就可以表達(dá)兩段基因，而且互不影響，比如說2樓說的PET-DUET-1共表達(dá)體系就可以用···

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7樓2014-10-22 11:27:45

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2樓: Originally posted by jian212 at 2014-10-21 14:13:35
沒弄清楚你的目的？？你是要載體還是查文獻(xiàn)？？
載體的話PET-DUET-1就可以用

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8樓2014-10-22 11:28:30

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7樓: Originally posted by s1g2k3 at 2014-10-22 11:27:45
我是要用絲狀真菌表達(dá)，需要同源重組，如果我這兩個(gè)基因查到一個(gè)基因里進(jìn)行同源重組，兩個(gè)能分別表達(dá)么？是不是需要各自都有啟動(dòng)子。...

抱歉，這個(gè)不太清楚，沒有做過···

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9樓2014-10-22 15:11:31

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NEB的試劑盒，沒用過，可以參考
https://www.neb.com/applications/cloning-and-synthetic-biology/gibson-assembly-cloning

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10樓2014-10-23 21:49:24

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