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[求助] 請(qǐng)教各位高人關(guān)于碘顯色測(cè)酶活的問(wèn)題~~~ 已有1人參與

小蟲(chóng)最近在測(cè)定淀粉酶酶活，胞外酶與淀粉反應(yīng)后用碘顯色測(cè)定支鏈淀粉含量，但是發(fā)現(xiàn)碘與反應(yīng)液接觸后立即褪色至吸光值為0.000，滅酶對(duì)照組也是一樣的情況。之前師姐測(cè)定胞內(nèi)酶的酶活時(shí)沒(méi)有發(fā)生這種情況，請(qǐng)問(wèn)，是碘與胞外酶的培養(yǎng)基反應(yīng)的原因么？（酶是同一種酶，只是宿主不一樣所以有胞內(nèi)胞外兩種。。。）

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1樓 2014-10-29 17:10:03

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2樓2014-10-29 20:08:52

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2樓: Originally posted by 答非所問(wèn) at 2014-10-29 20:08:52
我也是做酶的，比較感興趣，幫你高亮推薦下

謝謝斑竹！

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3樓2014-10-29 20:43:46

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3樓: Originally posted by hmmilier at 2014-10-29 20:43:46
謝謝斑竹！

...

請(qǐng)問(wèn)你的實(shí)驗(yàn)，有沒(méi)有做重復(fù)試驗(yàn)？是不是試劑問(wèn)題，你做的淀粉酶酶活，我還真沒(méi)有測(cè)過(guò)

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4樓2014-10-29 21:13:50

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4樓: Originally posted by 答非所問(wèn) at 2014-10-29 21:13:50
請(qǐng)問(wèn)你的實(shí)驗(yàn)，有沒(méi)有做重復(fù)試驗(yàn)？是不是試劑問(wèn)題，你做的淀粉酶酶活，我還真沒(méi)有測(cè)過(guò)...

做過(guò)很多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)了，一直都是這個(gè)現(xiàn)象。也換個(gè)其它方法，但是不夠穩(wěn)定，還想嘗試一下碘量法，所以就來(lái)請(qǐng)教一下各位這是什么原因，能不能解決~

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5樓2014-10-29 21:41:22

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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hmmilier: 金幣+10, ★有幫助 2014-10-29 21:59:29

我感覺(jué)是你，底物：淀粉選取的量不恰當(dāng)（過(guò)少），所致，你的胞外酶把淀粉都氧化了，你的碘怎么可能顯色呢、、

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6樓2014-10-29 21:56:49

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6樓: Originally posted by 答非所問(wèn) at 2014-10-29 21:56:49
我感覺(jué)是你，底物：淀粉選取的量不恰當(dāng)（過(guò)少），所致，你的胞外酶把淀粉都氧化了，你的碘怎么可能顯色呢、、

之前也這么認(rèn)為過(guò)，但是相比于胞內(nèi)酶，胞外酶的電泳條帶非常淺且細(xì)，胞外酶的酶活應(yīng)該不會(huì)高于胞內(nèi)酶的~~

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7樓2014-10-29 22:01:49

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這次你的體系（總體積，底物濃度，以及碘濃度）和你師姐的都是一樣的？

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8樓2014-10-30 09:01:36

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8樓: Originally posted by 答非所問(wèn) at 2014-10-30 09:01:36
這次你的體系（總體積，底物濃度，以及碘濃度）和你師姐的都是一樣的？

一樣的呢。在嘗試改變之前的體系試一下~

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9樓2014-10-30 09:18:08

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9樓: Originally posted by hmmilier at 2014-10-30 09:18:08
一樣的呢。在嘗試改變之前的體系試一下~...

是的，你可以試著略微改變下體系試下

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10樓2014-10-30 12:16:03

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