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宋偉同學(xué)銅蟲 (著名寫手)
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[交流]
如何設(shè)計(jì)RTPCR引物，用什么軟件和網(wǎng)站。謝謝大神。 已有6人參與
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| 是做果蠅的神經(jīng)生物學(xué)，謝謝大神。 |
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honinglee
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2樓2014-11-03 22:36:12
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3樓2014-11-04 07:43:55
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4樓2014-11-04 15:40:21
wendywan
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-11-04 22:52:45
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西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-11-04 22:52:45
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我一般用兩種方式來(lái)找RT-PCR primer，成功率高！ 1 找文章中的已報(bào)到的引物，這個(gè)一般是99%的成功率，有時(shí)小雜志的primer有點(diǎn)不太完美。 2 直接在線設(shè)計(jì)，用NCBI中的blast，把mRNA序列放進(jìn)去，長(zhǎng)度100-400bp，挺好用的，或者有些把CD序列擱進(jìn)去，primer-blast。選擇3-4對(duì)進(jìn)行合成即可。這個(gè)也基本上都會(huì)有想要的。 以上的引物p出來(lái)的產(chǎn)物，如果條帶正確，挑選一兩對(duì)測(cè)序下，看看產(chǎn)物是否正確。 這算是最簡(jiǎn)單的了，我感覺(jué)。不用費(fèi)腦子。。。。呵呵 |
5樓2014-11-04 16:07:03
wendywan
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6樓2014-11-04 16:07:52
7樓2014-11-04 16:09:48
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8樓2014-11-04 20:40:04
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