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zb杏子

新蟲 (初入文壇)

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蟲號: 3199690
注冊: 2014-05-12
專業(yè): 獸醫(yī)寄生蟲學(xué)

[求助] BL21表達(dá)蛋白量很低

我用BL21 表達(dá)兩個(gè)甘露醇合成酶，都是用pET30a構(gòu)建表達(dá)載體，第一個(gè)表達(dá)大小是42kD左右，第二個(gè)是71kD左右。第一個(gè)有表達(dá)趨勢，大小正確，包涵體和可溶都有，量還可以；第二個(gè)依稀有表達(dá)，大小也差不多，包涵體中較多，可溶也有，但量少到可以忽略。第一個(gè)蛋白純化效果還可以，第二個(gè)因?yàn)榱可�，相對的雜蛋白的量很大，多次純化效果都不好，在40和70kD都會出現(xiàn)明顯的帶。且用抗His的一抗做WB，神奇的是兩種蛋白在 40和70kD兩個(gè)位置均出現(xiàn)了亮帶，不同的是，第一個(gè)蛋白在目的位置40kD的帶特別亮,而70kD處較弱，而第二個(gè)蛋白在兩個(gè)位置的帶亮度差異不大。這個(gè)求大神指點(diǎn)�。。。。。。。。。。。。。。�！

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1樓 2014-12-22 21:09:27

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

智能機(jī)器人

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