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RT-PCR反應空白對照和陰性對照都P出條帶了是怎么回事 已有10人參與
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勞駕各位老師 ：我買的RT-PCR是兩個盒子一個是提RNA的盒子，一個是RT-PCR反應的盒子。這個RT-PCR反應的盒子將反轉錄反應和PCR反應合為一步，具體操作就需要加盒子里的反應液（具體怎么配置的沒說）、酶和模板就OK了，也就說正個反轉錄反應PCR反應的加樣工作就完成了。我的問題是，開始按照說明書的步驟做：提RNA后進行RT-PCR反應跑膠結果空白對照、陰性對照、陽性對照及所有樣品都有目的條帶，只是陽性對照條帶更亮、更粗，值得一提的是空白對照、陰性對照以及樣品的條帶亮度、粗細都差不多。后來為了排除提RNA過程的操作問題我沒提RNA直接在RT-PCR反應液里分別加無酶水、陰性和陽性對照，結果還是都跑出了目的條帶而且條帶亮度、粗細基本一致。請問各位老師是廠家的RT-PCR反應的盒子有問題，還是別的其他什么原因？感謝各位，圣誕快樂  �。�！ |
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