 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1231 | 回復(fù): 6 | ||
小朱大寶新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
PCR反應(yīng)體系改變會(huì)導(dǎo)致電泳不出帶嗎 已有2人參與
|
 以反轉(zhuǎn)錄后的cDNA為模板，在擴(kuò)增管家基因（18s RNA）的時(shí)候，剛開始用的是10μl反應(yīng)體系，體系中用的是PCR Mix，電泳后有出現(xiàn)條帶。但由于是新手的關(guān)系，忘記加空白對(duì)照跟Marker，加上電泳時(shí)間長(zhǎng)了一點(diǎn)，所以無(wú)法確定P出來(lái)的條帶是否為目的的管家基因。因此，后來(lái)又重新做了一次實(shí)驗(yàn)，這次用的是25μl反應(yīng)體系，而且沒有用PCR Mix，用的是HSTaq酶。就只是改變了反應(yīng)體系，PCR反應(yīng)條件一直沒有改變，但是電泳后跑不出條帶。10μl反應(yīng)體系： 25μl反應(yīng)體系: PCR Mix 5 10X Buffer 2.5 Pf 0.2 dNTPs 2 pr 0.2 pf 0.2 cDNA 0.5 pr 0.5 ddH2O 4.1 Taq 0.125 cDNA 1 ddH2O 18.675 total 10 μl total 25μl 請(qǐng)問(wèn)各位高手，是哪里出了問(wèn)題。 10μl反應(yīng)體系電泳圖.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有198人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- PCR電泳條帶為什么會(huì)這樣？（附圖）
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 引物濃度不一致會(huì)導(dǎo)致PCR無(wú)擴(kuò)增帶么？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 電泳圖引物條帶很亮，目的產(chǎn)物條帶不亮
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 關(guān)于PCR反應(yīng)液純化回收后再電泳的問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- PCR酶、模板、dNTP換了以后P出來(lái)的目的條帶很少，在目的條帶上有一團(tuán)很亮，是為什么？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 跑PCR，瓊脂糖電泳沒有條帶出現(xiàn)
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 急！各位幫忙看看，PCR后跑的瓊脂糖凝膠電泳圖，條帶不清晰原因是什么？
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 提取DNA后，PCR電泳無(wú)條帶
已經(jīng)有5人回復(fù)
- PCR電泳圖求解
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 普通的PCR，一樣的體系、程序，為什么結(jié)果不同？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- PCR產(chǎn)物直接雙酶切后電泳看不到條帶
已經(jīng)有30人回復(fù)
- PCR擴(kuò)增不出目的條帶
已經(jīng)有12人回復(fù)
- PCR不出目的條帶的原因
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 為什么做PCR時(shí)候模板濃度高了會(huì)擴(kuò)增不出目的片段？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- PCR反應(yīng)體系求助
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 總dna電泳有條帶，但PCR后只有引物二聚體
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 兩種引物的PCR電泳圖，做了多次還是不解
已經(jīng)有18人回復(fù)
- PCR電泳，加樣孔很亮，但目的條帶卻很淡，不知道怎么回事？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 流感病毒RT-PCR，電泳老是跑不出條帶~~~糾結(jié)！
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 反轉(zhuǎn)錄后PCR無(wú)條帶
已經(jīng)有5人回復(fù)
- PCR后電泳條帶異常
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR反應(yīng)體系請(qǐng)教！
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】pcr結(jié)果電泳條帶很淡
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】（5.20更新）PCR產(chǎn)物電泳沒有條帶，why?
已經(jīng)有20人回復(fù)
peterrjp
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 65 (初中生)
- 金幣: 24487.5
- 紅花: 16
- 帖子: 2608
- 在線: 67小時(shí)
- 蟲號(hào): 395640
- 注冊(cè): 2007-06-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生態(tài)學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+2, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-20 19:44:53
小朱大寶: 金幣+3 2014-10-21 14:26:23
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+2, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-20 19:44:53
小朱大寶: 金幣+3 2014-10-21 14:26:23
| 跟體系的擴(kuò)大沒關(guān)系。應(yīng)該跟你用的試劑不同有關(guān)。你第一次用的mix，又沒有加對(duì)照，無(wú)法確定是不是mix本身污染導(dǎo)致的條帶。第二次用的HSTaq酶體系，沒有陽(yáng)性對(duì)照，不能排除試劑是否有問(wèn)題，比如酶失活了。你這個(gè)圖是第一次還是第二次？ |
2樓2014-10-20 16:42:02
小朱大寶
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 21.5
- 帖子: 9
- 在線: 11.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1934100
- 注冊(cè): 2012-08-11
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
3樓2014-10-20 17:21:04
peterrjp
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 65 (初中生)
- 金幣: 24487.5
- 紅花: 16
- 帖子: 2608
- 在線: 67小時(shí)
- 蟲號(hào): 395640
- 注冊(cè): 2007-06-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生態(tài)學(xué)
4樓2014-10-20 19:27:51
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小朱大寶: 金幣+1, ★有幫助 2014-10-22 15:02:01
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小朱大寶: 金幣+1, ★有幫助 2014-10-22 15:02:01
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
5樓2014-10-21 01:21:31
HalaRoller
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 46
- 帖子: 40
- 在線: 32.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 2168163
- 注冊(cè): 2012-12-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 果樹學(xué)
6樓2015-01-17 00:17:34
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
7樓2015-01-18 16:51:14
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 小朱大寶 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 081700化工學(xué)碩調(diào)劑 +3 | 【1】 2026-03-16 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +9 | 冷笙123 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | z1z2z3879 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 東華理工大學(xué)化材專業(yè)26屆碩士博士申請(qǐng) +8 | zlingli 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿天大材料與化工（085600）總分338 +5 | 蔡大美女 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩調(diào)劑 +5 | 204818@lcx 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以） +3 | xbxudjdn 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 26調(diào)劑/材料/英一數(shù)二/總分289/已過(guò)A區(qū)線 +7 | 步川酷紫123 2026-03-13 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 331求調(diào)劑（0703有機(jī)化學(xué) +7 | ZY-05 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +12 | 小熊joy 2026-03-14 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +4 | 睿08 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級(jí)食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八6八68 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)]
今年的國(guó)基金是打分制嗎？
 50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 22408總分284求調(diào)劑 +3 | InAspic 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科南京大學(xué)一志愿川大藥學(xué)327 +3 | 麥田耕者 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工 323 英一+數(shù)二+物化，一志愿：哈工大 本人本科雙一流 +4 | 自由的_飛翔 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 7712b 2026-03-13 | 7/350 |
|