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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 核酸提取 » 異硫氰酸胍提取DNA
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天空的藍銅蟲 (小有名氣)
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異硫氰酸胍提取DNA 已有4人參與
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| 剛開始做細菌分子實驗，請問哪位大神能告訴我異硫氰酸胍與DNA、RNA的作用機理嗎？它作為提取DNA的藥劑有什么好壞呢？實在不懂，希望不吝賜教，謝謝~~~~ |
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【答案】應助回帖
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天空的藍(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵熱心回帖交流 2015-01-24 20:46:48
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1.異硫氰酸胍消化液 異硫氰酸胍4mol/L 檸檬酸鈉(PH7.0)25mmol/L 十二烷基肌酸鈉0.5% β-巰基乙醇0.1mol/L 2.消化方法：用50～100ul細胞懸液及血清，加等體積的異硫氰酸胍消化液振混勻后，或65℃1小時，或室溫放置數(shù)分鐘，然后加1/10體積的3mmol/LpH5.2的醋酸鈉緩沖液，再加等體積的酚：氯仿，用力振搖約10s，10000r/min，離心5min，取上清加等體積異丙醇-20℃放置3h后，14000r/min離心15min，沉定用75%冰冷乙醇離心洗滌1～2次，真空干燥，沉淀用TE緩沖液溶解即可用于逆轉錄PCR擴增，或放-20℃保存。 |
2樓2015-01-24 18:44:59
3樓2015-08-21 13:18:27
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5樓2020-10-09 09:50:50
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6樓2020-10-10 12:09:04
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