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請問qPCR時,目的基因與內(nèi)參的CT值之差大于10,是不是說明表達(dá)非常低?? 已有3人參與
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我是qPCR新手,想請教大家兩個問題,大家互相探討。 1、我之前做過一個基因的普通PCR,跑膠結(jié)果顯示樣本A沒有條帶,B有明顯的帶,內(nèi)參18S是齊的。然后同樣的樣本做了qPCR,發(fā)現(xiàn)樣本A與18s的CT值之差為10左右,而樣本B為2。我的問題是,目的基因與內(nèi)參的CT 值之差大于10,是否說明目的基因表達(dá)量很低甚至不表達(dá)?這可以作為一個標(biāo)準(zhǔn)嗎?如果不是這樣,是否就只能與陰性對照(即不加cDNA模板)進(jìn)行對比來判斷基因是否不表達(dá)? 2、如果要用qPCR檢測某個基因是否被敲除掉,可以用上面提到的方法嗎?(與內(nèi)參的CT值比較,或者與陰性對照CT值比較) 謝謝大家了。! |
木蟲 (小有名氣)
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至尊木蟲 (知名作家)
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