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請問qPCR時(shí)，目的基因與內(nèi)參的CT值之差大于10，是不是說明表達(dá)非常低？？ 已有3人參與
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我是qPCR新手，想請教大家兩個(gè)問題，大家互相探討。 1、我之前做過一個(gè)基因的普通PCR，跑膠結(jié)果顯示樣本A沒有條帶，B有明顯的帶，內(nèi)參18S是齊的。然后同樣的樣本做了qPCR，發(fā)現(xiàn)樣本A與18s的CT值之差為10左右，而樣本B為2。我的問題是，目的基因與內(nèi)參的CT 值之差大于10，是否說明目的基因表達(dá)量很低甚至不表達(dá)？這可以作為一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)嗎？如果不是這樣，是否就只能與陰性對照（即不加cDNA模板）進(jìn)行對比來判斷基因是否不表達(dá)？ 2、如果要用qPCR檢測某個(gè)基因是否被敲除掉，可以用上面提到的方法嗎？（與內(nèi)參的CT值比較，或者與陰性對照CT值比較） 謝謝大家了�。�！ |
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bbqlhb
木蟲 (小有名氣)
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fuyuandj86
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5樓2015-02-14 06:42:50
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