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guoguo201209新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
為何有的PCR實(shí)驗(yàn)，延伸溫度用60度？ 已有3人參與
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| 查閱了相關(guān)文獻(xiàn)，同一種酶，為何擴(kuò)增一對(duì)引物用的延伸溫度是68度，而擴(kuò)增另一對(duì)引物強(qiáng)調(diào)延伸溫度是60度才能擴(kuò)增出來(lái)。延伸溫度不是根據(jù)酶來(lái)確定的嗎？為何要改變才能擴(kuò)增出來(lái)呢？求大俠指點(diǎn) |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 延伸溫度由引物決定，PCR中，只要酶用的好，設(shè)計(jì)引物的時(shí)候則無(wú)需考慮酶的問(wèn)題。酶的活性溫度不需要考慮，因?yàn)橛糜赑CR的酶起碼的條件也是耐熱酶（普通Taq或熱啟動(dòng)Taq酶），不然怎么擴(kuò)增呢 |
3樓2015-03-03 09:50:31
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8樓2015-03-18 05:06:31
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