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guoguo201209新蟲 (小有名氣)
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[求助]
為何有的PCR實(shí)驗(yàn),延伸溫度用60度? 已有3人參與
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| 查閱了相關(guān)文獻(xiàn),同一種酶,為何擴(kuò)增一對(duì)引物用的延伸溫度是68度,而擴(kuò)增另一對(duì)引物強(qiáng)調(diào)延伸溫度是60度才能擴(kuò)增出來(lái)。延伸溫度不是根據(jù)酶來(lái)確定的嗎?為何要改變才能擴(kuò)增出來(lái)呢?求大俠指點(diǎn) |
銅蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
小蟲
| 延伸溫度由引物決定,PCR中,只要酶用的好,設(shè)計(jì)引物的時(shí)候則無(wú)需考慮酶的問(wèn)題。酶的活性溫度不需要考慮,因?yàn)橛糜赑CR的酶起碼的條件也是耐熱酶(普通Taq或熱啟動(dòng)Taq酶),不然怎么擴(kuò)增呢 |

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