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lu12306新蟲 (初入文壇)
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[求助]
以cDNA為模板擴(kuò)增的目的基因發(fā)現(xiàn)有內(nèi)含子？
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以cDNA為模板擴(kuò)增的目的基因，有幾個(gè)問題請(qǐng)教一下大家： 問題：1.發(fā)現(xiàn)有內(nèi)含子，目的基因比預(yù)期的大了600bp。這是可變剪接的原因？ 2.一開始以為與沒消化DNA有關(guān)，但是前段時(shí)間做了以DNA為模板擴(kuò)增該目的基因，進(jìn)行測序。發(fā)現(xiàn)以cDNA為模板的測序結(jié)果和以DNA為模板的測序結(jié)果相似性很低（NCBI Blast），并且兩者的內(nèi)含子也不一樣（在cDNA上的內(nèi)含子有的是在DNA上的閱讀框里）。我覺得應(yīng)該不是與沒消化DNA有關(guān)吧。你們覺得呢？ 3.TA克隆測序結(jié)果中找不到正向引物序列。生工說是用載體上的通用引物測序的，并且我的引物是特異性的，按理說可以找到正向引物序列呀。這是為什么？ |
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2樓2015-03-06 21:34:28
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