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well_想太多新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
sds-page跑電泳Marker為什么只跑出四條帶 已有3人參與
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| 我跑的蛋白大小差不多36KDa，用的marker是takala公司的，大小分別是97.2,66.4,44.3,29.0,20.1,14.3KDa，濃縮膠時(shí)用的是10mA電流，分離膠是20mA，可是跑完只有marker只有4條帶，請(qǐng)問(wèn)這是怎么回事呢？是電流的原因嗎？當(dāng)我用20mA跑分離膠時(shí)電壓達(dá)到了220V左右，這樣正常嗎？還有我考察了一下不同濃度IPTG的誘導(dǎo)效果，但是結(jié)果都差不多，請(qǐng)問(wèn)IPTG的濃度選擇與蛋白分子量大小有關(guān)嗎？我都是按照同實(shí)驗(yàn)室跑200KDa蛋白的同學(xué)的數(shù)據(jù)來(lái)的，他的IPTG濃度從0.01-1不等 |
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2樓2015-03-12 17:38:03
3樓2015-03-12 23:19:14
well_想太多
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4樓2015-03-13 09:45:17
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5樓2015-03-13 09:46:47
【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
well_想太多: 金幣+1, ★有幫助 2015-03-14 21:06:31
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well_想太多: 金幣+1, ★有幫助 2015-03-14 21:06:31
| 12%的分離膠的話按照樓主的描述不應(yīng)該是跑出去了，個(gè)人建議檢查一下電泳的其他東西，包括緩沖液等等，我們實(shí)驗(yàn)室以前就出現(xiàn)過(guò)有人配母液配錯(cuò)，導(dǎo)致大家跑出來(lái)的條帶都出現(xiàn)問(wèn)題。。。我們實(shí)驗(yàn)室當(dāng)時(shí)是配母液的人電泳緩沖Buffer沒(méi)有給加SDS，最后導(dǎo)致好多人那天跑出來(lái)的膠都是marker條帶形狀都不對(duì) |
6樓2015-03-13 09:57:24
7樓2015-03-13 10:29:02
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