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qaz139687

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[求助] 5端race產(chǎn)物著么與載體連接已有1人參與

5’ race產(chǎn)物是不是要先做一個(gè)加A的PCR實(shí)驗(yàn)，才能拿來(lái)與載體連接，不然是連接不上的？順便求加A的PCR體系和程序。

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1樓 2015-03-27 11:01:01

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5 race是用clonteck的試劑盒做的

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2樓2015-03-27 13:07:43

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西門吹雪170: 2015-03-28 23:26:05
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-03-28 23:26:24

不用的，taq酶會(huì)在pcr過(guò)程中自動(dòng)加A，發(fā)生在72度延伸十分鐘。
所以你直接拿5race產(chǎn)物純化連接就好。

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3樓2015-03-27 16:14:06

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引用回帖:

3樓: Originally posted by 墨爾本機(jī)器 at 2015-03-27 16:14:06
不用的，taq酶會(huì)在pcr過(guò)程中自動(dòng)加A，發(fā)生在72度延伸十分鐘。
所以你直接拿5race產(chǎn)物純化連接就好。

clonteck試劑盒里的高效酶也有這個(gè)嗎，不是說(shuō)有些酶是沒(méi)有的嗎

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4樓2015-03-27 16:19:35

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qaz139687: 金幣+3, ★★★★★最佳答案 2015-03-28 16:31:37

引用回帖:

4樓: Originally posted by qaz139687 at 2015-03-27 16:19:35
clonteck試劑盒里的高效酶也有這個(gè)嗎，不是說(shuō)有些酶是沒(méi)有的嗎...

clonteck試劑盒里也是taqDNA聚合酶，都會(huì)加A的

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5樓2015-03-27 16:52:08

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【答案】應(yīng)助回帖

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qaz139687: 金幣+2 2015-03-28 16:31:41

不用的，taq酶會(huì)在pcr過(guò)程中自動(dòng)加A，發(fā)生在72度延伸十分鐘。
所以你直接拿5race產(chǎn)物純化連接就好。
clontech也是taq酶，放心做

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6樓2015-03-27 16:53:42

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