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id90銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
畢赤酵母GS115搖瓶發(fā)酵 已有2人參與
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根據(jù)畢赤酵母表達(dá)手冊(cè)，我一般都是YPD活化，之后按1%接種到25ml的BMGY培養(yǎng)基，培養(yǎng)16-18h（OD=4-6），之后離心收集菌體，加入到100ml的BMMY培養(yǎng)基至終OD=1，每天加甲醇誘導(dǎo)。 但是最近看文獻(xiàn)有的是 25ml BMGY培養(yǎng)后 用5ml 的BMMY重懸 之后繼續(xù)培養(yǎng)。哪種方法正確？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
laozuzunzhe: 金幣+3, 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2015-04-07 11:07:12
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
laozuzunzhe: 金幣+3, 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2015-04-07 11:07:12
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這應(yīng)該是同一種方法吧，你在BMGY中培養(yǎng)結(jié)束后離心后收集菌體再加入到BMMY中，這一步就是用少量BMMY重懸后，再增大BMMY體積進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)吧。 簡(jiǎn)單說就是都正確。事實(shí)上，有文獻(xiàn)預(yù)計(jì)BMGY中的甘油耗盡后不離心，直接加入BMMY進(jìn)行誘導(dǎo)，我們驗(yàn)證過此種方法表達(dá)量沒有區(qū)別。 |
2樓2015-04-02 09:43:22
3樓2015-04-02 14:58:06
id90
銅蟲 (初入文壇)
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4樓2015-04-02 15:11:44
5樓2015-04-03 15:47:13
ggyy0911
鐵蟲 (正式寫手)
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6樓2015-06-07 15:18:41
7樓2016-09-23 15:35:17
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