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王憶楠yn新蟲 (小有名氣)
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[求助]
pcr反應(yīng)cytb序列擴(kuò)不出原因？求分析！ 已有2人參與
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本人本科生，目前做書虱的種內(nèi)鑒定。之前用引物擴(kuò)增ITS序列，電泳出現(xiàn)條帶，但是送去公司檢測(cè)，說亮帶里有比較亂，無法測(cè)序。現(xiàn)在用引物擴(kuò)增cytb序列，發(fā)現(xiàn)沒有條帶。 試劑 ddh2o 31.5ul dNTP 4ul buffer(Mg2+) 5ul 引物1 1.5ul 4個(gè)ep管分裝 每個(gè)ep12.5ul 引物2 1.5ul taq酶 0.5ul 模板 6ul （之前老師也做過幾次，同樣沒有條帶）退火溫度為40.0 41.2 43.9 47.7 52.6 56.5 58.8 60.0“℃。 模板有一年了，但是its 有條帶，很亮，只是無法測(cè)序。用新的模板可以擴(kuò)出很亮的條帶（cytb）。想求助是不是模板的問題. cytb: F TATGTACTACCATGAGGACAAATAT R ATTACACCTCCTAATTATTAGGAAT |
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lomis
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4樓2015-04-10 09:22:43
lomis
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王憶楠yn
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5樓2015-04-10 10:13:13
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