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rola234新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助做過CHO質(zhì)粒載體構(gòu)建或改造的大神！載體序列未知，要如何對載體進(jìn)行合理改造？
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| 老板給了我兩個實(shí)驗室常用的CHO表達(dá)載體，都是穿梭載體，但受制于公司專利，我們只有這兩個質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)圖，并沒有全長DNA堿基序列，就連多克隆位點(diǎn)的那段不長的DNA序列也沒有，師兄師姐們用這兩個載體時也就是酶切酶連一下，然后用上面的NeoR基因篩選一下陽性克隆，也沒有去關(guān)注過要怎樣去進(jìn)行改造和優(yōu)化。老板的意思是對這兩個現(xiàn)有的質(zhì)粒載體進(jìn)行改造，使之成為我們實(shí)驗室自主知識產(chǎn)權(quán)的表達(dá)載體，并且要能順利表達(dá)我們實(shí)驗室自制的抗體蛋白，請問有這方面經(jīng)驗的大神嗎？如果沒有載體的全長DNA堿基序列，單靠多克隆位點(diǎn)上的那幾個酶切位點(diǎn)要怎么對載體進(jìn)行改造�。磕芴峁┮恍┧悸芬埠冒�！謝謝大家！ |
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