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mtyx銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
裂解液提蛋白 已有4人參與
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| 我用裂解液提蛋白，離心后，說是取上清液，可是我離心后，不分層也沒有沉淀，我想問一下是什么原因啊 |
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 蛋白表達(dá)純化與檢測 |
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2樓2015-06-27 16:39:33
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★ ★
mtyx: 金幣+2, ★★★很有幫助 2015-06-30 08:46:59
mtyx: 金幣+2, ★★★很有幫助 2015-06-30 08:46:59
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后續(xù)做WB的話，這點細(xì)胞有點點少的樣子，建議用一小瓶長滿的細(xì)胞或者一個皿的細(xì)胞量來提取細(xì)胞。如果細(xì)胞珍貴可以用6孔板，先將培養(yǎng)基棄掉，用PBS漂洗2~3次，加入200ul裂解液，或者直接加入1X上樣緩沖液，用細(xì)胞刮刮下細(xì)胞，吸入到1.5ml EP管中煮沸5min后進(jìn)行電泳。細(xì)胞較少的話導(dǎo)致蛋白濃度過低，有些低豐度的目的蛋白在做WB檢測時有可能檢測不到，導(dǎo)致白板。祝好~~~ |
6樓2015-06-29 16:29:06
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7樓2015-06-30 15:21:20
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8樓2015-06-30 16:00:38
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9樓2015-06-30 20:37:15
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