 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1705 | 回復(fù): 4 | ||
[求助]
長片段PCR擴(kuò)增 已有2人參與
|
| 大家好，想請教下：我做全長克隆，分兩段分別設(shè)計引物擴(kuò)增目的片段，先反轉(zhuǎn)為cDNA，再PCR。我的片段一段為4324bp，一段為2100bp，但是4324bp的一直擴(kuò)增不出來，引物二聚體挺亮。2100bp擴(kuò)增出來了，但特異性不好。我用的takara的PrimeScript II 1st Strand cDNA合成試劑盒合成cDNA，PCR用PrimeSTAR Max DNA Polymerase和LA Taq with GC Buffer 分別擴(kuò)增過，長片段一直也擴(kuò)增不出來，我的PCR程序：98℃ 2min,(98℃ 10s, 60℃ 15s, 72℃ 5min)*35, 72℃ 5min。中途解鏈時間，退火溫度時間均延長過，一直沒結(jié)果。引物是沒有問題的，已檢查比對過。謝謝。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有161人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 關(guān)于pcr擴(kuò)增目的片段的問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 求長片段pcr擴(kuò)增大神�。。。�！
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 長片段PCR點(diǎn)樣孔亮帶，目的條帶無法擴(kuò)增
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 長片段DNA擴(kuò)增后電泳掛孔問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 10kb長片段pcr參數(shù)該設(shè)置什么
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 大神請留步！�。￠L片段ＰＣＲ擴(kuò)增�。�！
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 急求，pcr擴(kuò)增cDNA時擴(kuò)增出了基因組的片段。接下來該怎么辦。
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 關(guān)于PCR 擴(kuò)增 引物可以擴(kuò)增多長的模板
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 求長片段（7.5 kb）PCR擴(kuò)增方法？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- PCR擴(kuò)增環(huán)狀質(zhì)粒全長怎么做？
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 菜鳥求助：PCR擴(kuò)增和擴(kuò)增產(chǎn)物的克��？？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 噬菌體文庫PCR擴(kuò)增擴(kuò)不出片段
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 關(guān)于長片段PCR
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 鼠基因組的PCR擴(kuò)增
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 有誰做過長片段PCR（15K左右）
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 短片段PCR擴(kuò)增
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 長片段PCR擴(kuò)增
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 基因組中長片段PCR應(yīng)該注意的幾個問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 求助！PCR擴(kuò)增不出全長DNA序列怎么辦？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】為什么PCR擴(kuò)增產(chǎn)物片段長度比設(shè)計時的要長很多？
已經(jīng)有10人回復(fù)
凱倫愛佳佳
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 1571.1
- 散金: 97
- 紅花: 1
- 帖子: 321
- 在線: 75.5小時
- 蟲號: 3487227
- 注冊: 2014-10-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 水產(chǎn)生物免疫學(xué)與病害控制
2樓2015-11-01 21:48:52
zhangyao7255
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 478.7
- 紅花: 4
- 帖子: 109
- 在線: 29.2小時
- 蟲號: 640444
- 注冊: 2008-10-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 發(fā)育生物學(xué)
3樓2015-11-01 23:22:42
足下客
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 39 (小學(xué)生)
- 金幣: 1858.8
- 散金: 211
- 紅花: 12
- 帖子: 888
- 在線: 110.4小時
- 蟲號: 426612
- 注冊: 2007-07-28
- 性別: MM
- 專業(yè): 臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)
4樓2015-11-02 08:45:28
5樓2015-11-03 09:33:34
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 liuliqujing 的主題更新
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 小木蟲085600 2026-03-27 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿上海理工能源動力（085800）310分求調(diào)劑 +3 | zhangmingc 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +17 | 顧九笙要謙虛 2026-03-24 | 23/1150 |
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +10 | 金恩貝 2026-03-21 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)081700，初試分?jǐn)?shù)271 +6 | kotoko_ik 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 298調(diào)劑 +3 | jiyingjie123 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑。有半年電池和半年高分子實(shí)習(xí)經(jīng)歷 +10 | 材料學(xué)257求調(diào)劑 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求收留 +7 | 果然有我 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +7 | 青檸檬1 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +6 | wfh030413@ 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)工程085602 305分求調(diào)劑 +17 | RichLi_ 2026-03-25 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 材料考研求調(diào)劑 +3 | Dendel 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +6 | 生如夏花… 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)339材料與化工求調(diào)劑 +3 | 江往賣魚 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | 032500 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 324 +4 | Promise-jyl 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 化工專碩求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 306求0703調(diào)劑一志愿華中師范 +10 | 紙魚ly 2026-03-21 | 11/550 |
|
|
|
[考研]
 材料考研調(diào)劑生
+3
|
黃粱一夢千年 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿國科過程所081700，274求調(diào)劑 +3 | 三水研0水立方 2026-03-23 | 3/150 |
|