panyax

4樓: Originally posted by panyax at 2015-12-23 10:52:41
這是我酶切之后跑的回收膠電泳圖，第一個(gè)泳道是maker，2,3,4泳道是同一個(gè)樣品，我把它們做一管回收的；5，6泳道是一個(gè)樣品，我也是做一管回收的。這種情況，我是不是只能?chē)L試下酶切膠回收之后，直接連表達(dá)載體試試 ...

可以

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6樓2015-12-23 12:36:03

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嗎子

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

每管酶切體系增大質(zhì)粒量，比如20 uL體系里加10 uL質(zhì)粒；然后多切幾管質(zhì)粒，比如10管。
你切的質(zhì)粒太少了。

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深秋

7樓2015-12-24 16:16:44

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Huobol

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【答案】應(yīng)助回帖

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同意7樓，你切的質(zhì)粒模板可能太少了，增加模板量，多做幾管再膠回收吧！模板量也別加太多，雙酶切不完全的話會(huì)出現(xiàn)3條的，我曾經(jīng)出現(xiàn)過(guò)，模板加多了，吼吼~

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讓羽毛再飛一會(huì)兒

8樓2015-12-25 09:35:38

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panyax

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引用回帖:

8樓: Originally posted by Huobol at 2015-12-25 09:35:38
同意7樓，你切的質(zhì)粒模板可能太少了，增加模板量，多做幾管再膠回收吧！模板量也別加太多，雙酶切不完全的話會(huì)出現(xiàn)3條的，我曾經(jīng)出現(xiàn)過(guò)，模板加多了，吼吼~

嗯，昨天重新抽了質(zhì)粒，我感覺(jué)應(yīng)該就是濃度的問(wèn)題，回收出來(lái)了，謝謝

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9樓2015-12-25 10:50:34

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引用回帖:

7樓: Originally posted by 嗎子 at 2015-12-24 16:16:44
每管酶切體系增大質(zhì)粒量，比如20 uL體系里加10 uL質(zhì)粒；然后多切幾管質(zhì)粒，比如10管。
你切的質(zhì)粒太少了。

嗯，重新抽了質(zhì)粒再酶切回收就成功了……

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10樓2015-12-25 10:51:15

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