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18716248350新蟲 (小有名氣)
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[求助]
pet28a表達引物設計問題 已有1人參與
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| 想研究一個蛋白的功能和性質(zhì)，用pet28a表達，引物設計時目的基因要不要加入起始密碼子和終止密碼子，選擇的是hindIII和EcoR I這兩個酶切位點 |
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2樓2016-07-17 14:01:54
18716248350
新蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 預防醫(yī)學其他科學問題
3樓2016-07-17 14:48:26
獨立衛(wèi)生間
金蟲 (初入文壇)
- 應助: 1 (幼兒園)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學
【答案】應助回帖
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可以直接用NdeI或NcoI位點中的ATG作為起始密碼子，如果是前者應該加上終止密碼子，his標簽在蛋白N端；如果是后者的話不需要終止密碼子，標簽在C端。建議使用前者，N端標簽對蛋白構(gòu)象影響較小。如果想用其他酶切位點的話，無法避免引入多余氨基酸，而且必須添加終止密碼子和起始密碼子！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2016-07-21 22:11:00
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