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18716248350新蟲 (小有名氣)
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[求助]
pet28a表達(dá)引物設(shè)計(jì)問題 已有1人參與
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| 想研究一個(gè)蛋白的功能和性質(zhì)，用pet28a表達(dá)，引物設(shè)計(jì)時(shí)目的基因要不要加入起始密碼子和終止密碼子，選擇的是hindIII和EcoR I這兩個(gè)酶切位點(diǎn) |
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2樓2016-07-17 14:01:54
18716248350
新蟲 (小有名氣)
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3樓2016-07-17 14:48:26
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【答案】應(yīng)助回帖
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可以直接用NdeI或NcoI位點(diǎn)中的ATG作為起始密碼子，如果是前者應(yīng)該加上終止密碼子，his標(biāo)簽在蛋白N端；如果是后者的話不需要終止密碼子，標(biāo)簽在C端。建議使用前者，N端標(biāo)簽對(duì)蛋白構(gòu)象影響較小。如果想用其他酶切位點(diǎn)的話，無法避免引入多余氨基酸，而且必須添加終止密碼子和起始密碼子！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2016-07-21 22:11:00
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