 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2508 | 回復(fù): 15 | |||
聽(tīng)雪看山木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
西游家族之T所長(zhǎng)
|
[交流]
【求助/交流】單酶切載體竟然沒(méi)切開(kāi)，尋求原因？？ 已有5人參與
|
|
我用的載體是5500bp，酶是XmaI，去過(guò)磷酸化的。這個(gè)酶切已經(jīng)做過(guò)n多次了，插入基因就是沒(méi)辦法和載體連接上，自連現(xiàn)象嚴(yán)重。當(dāng)時(shí)以為是去磷酸化步驟的問(wèn)題，然后就做過(guò)2次去磷酸化。 后來(lái)在做完酶切后做了一個(gè)轉(zhuǎn)化，將50ng酶切液用電子穿孔儀轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞，隔夜培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)n多菌斑，那就是意味著沒(méi)有酶切成功，心里這個(gè)郁悶��！ 我用的這個(gè)酶據(jù)說(shuō)是比較難反應(yīng)的，所以當(dāng)時(shí)酶切都是隔夜至少10個(gè)小時(shí)以上了��！ 我現(xiàn)在真的是一點(diǎn)辦法也沒(méi)有了，本來(lái)就是新手，第一次做，竟然還碰到這么大的問(wèn)題，3個(gè)月了，一點(diǎn)進(jìn)展都沒(méi)有，著急��！ 懇請(qǐng)高手們給點(diǎn)建議，小蝦米在這多謝了�。� |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有248人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
天津商業(yè)大學(xué) 生物與醫(yī)藥課題組招生
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 載體單酶切后去磷酸化還會(huì)自連嗎？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 關(guān)于xba I單酶切后的TA連接
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 表達(dá)載體雙酶切
已經(jīng)有9人回復(fù)
- Eco88l單酶切pUC18，失敗原因及解決辦法？？？？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 載體酶切
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 質(zhì)粒單酶切出現(xiàn)兩條帶
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】大家酶切載體的時(shí)候回收完了用不用堿性磷酸酶處理啊？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】xho1單酶切，總連不上(片段3K,載體5K)
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】片段轉(zhuǎn)進(jìn)去，提質(zhì)粒酶切發(fā)現(xiàn)載體小了，想不明白
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒單酶切后竟然兩條帶
已經(jīng)有32人回復(fù)
- 【求助/交流】大家酶切載體怎么切？一般切多久？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【分享】關(guān)于載體雙酶切的一些經(jīng)驗(yàn)
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于克隆連接
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】單酶切連接的克隆急……
已經(jīng)有10人回復(fù)
gyesang
榮譽(yù)版主 (著名寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +24 - MolEPI: 31
- 應(yīng)助: 599 (博士)
- 貴賓: 2.689
- 金幣: 24334.9
- 散金: 1088
- 紅花: 88
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 2327
- 在線: 623.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 849017
- 注冊(cè): 2009-09-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
- 管轄: 分子生物
2樓2010-02-08 22:04:25
聽(tīng)雪看山
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
西游家族之T所長(zhǎng)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 貴賓: 1.037
- 金幣: 2112.6
- 散金: 3557
- 紅花: 43
- 沙發(fā): 3
- 帖子: 3644
- 在線: 445.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 509830
- 注冊(cè): 2008-02-23
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)
3樓2010-02-08 22:25:47
4樓2010-02-09 01:22:17
yang0071
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 207 (大學(xué)生)
- 金幣: 1573.4
- 散金: 9319
- 紅花: 21
- 帖子: 4041
- 在線: 647.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 50941
- 注冊(cè): 2004-07-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2010-02-09 10:51:07
聽(tīng)雪看山
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
西游家族之T所長(zhǎng)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 貴賓: 1.037
- 金幣: 2112.6
- 散金: 3557
- 紅花: 43
- 沙發(fā): 3
- 帖子: 3644
- 在線: 445.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 509830
- 注冊(cè): 2008-02-23
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)
6樓2010-02-09 20:43:23
wangjiasi
木蟲(chóng) (正式寫手)
- 應(yīng)助: 5 (幼兒園)
- 金幣: 2382.9
- 散金: 120
- 紅花: 4
- 帖子: 346
- 在線: 737.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 450308
- 注冊(cè): 2007-11-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
7樓2010-02-11 13:50:28
聽(tīng)雪看山
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
西游家族之T所長(zhǎng)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 貴賓: 1.037
- 金幣: 2112.6
- 散金: 3557
- 紅花: 43
- 沙發(fā): 3
- 帖子: 3644
- 在線: 445.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 509830
- 注冊(cè): 2008-02-23
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)
8樓2010-02-11 16:21:59
聽(tīng)雪看山
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
西游家族之T所長(zhǎng)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 貴賓: 1.037
- 金幣: 2112.6
- 散金: 3557
- 紅花: 43
- 沙發(fā): 3
- 帖子: 3644
- 在線: 445.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 509830
- 注冊(cè): 2008-02-23
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)
9樓2010-02-11 16:31:06
聽(tīng)雪看山
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
西游家族之T所長(zhǎng)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 貴賓: 1.037
- 金幣: 2112.6
- 散金: 3557
- 紅花: 43
- 沙發(fā): 3
- 帖子: 3644
- 在線: 445.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 509830
- 注冊(cè): 2008-02-23
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)
10樓2010-02-11 16:34:00
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 聽(tīng)雪看山 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿北交大材料工程總分358 +3 | cs0106 2026-04-02 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
 一志愿北京科技材料科學(xué)與工程288分，求調(diào)劑
+8
|
是辰啊 2026-04-02 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿085600中科院寧波所276分求調(diào)劑 +24 | 材料學(xué)257求調(diào)劑 2026-03-28 | 25/1250 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)308分求調(diào)劑（一志愿華東師大） +5 | 相信必會(huì)光芒萬(wàn)?/a> 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 805600專碩材料與化工348分求調(diào)劑 +6 | 上學(xué)啦！ 2026-04-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +9 | zzzzyk123 2026-04-01 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 262求調(diào)劑 +9 | 勵(lì)志一定發(fā)文章 2026-03-31 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 求0861交通運(yùn)輸專碩or材料專碩調(diào)劑 +4 | 勒布朗@ 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩 +10 | @taotao 2026-03-31 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 考研生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +7 | 鐵憨憨123425 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 土木304求調(diào)劑 +5 | 頂級(jí)擦擦 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 352分-085602-一志愿985 +6 | 海納百川Ly 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 375求調(diào)劑 +7 | 雨夏整夜 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等調(diào)劑 +8 | 哇呼哼呼哼 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +3 | 呼吸都是減肥 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +10 | 宋明欣 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +7 | DLkz1314. 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 本科雙非材料，跨考一志愿華電085801電氣，283求調(diào)劑，任何專業(yè)都可以 +6 | 芝士雪baoo 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京航空航天大學(xué)材料學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 298調(diào)劑 +3 | jiyingjie123 2026-03-27 | 3/150 |
|