 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (569)
- >導(dǎo)師招生 (47)
- >考研 (39)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (23)
- >考博 (18)
- >無(wú)機(jī)/物化 (10)
- >文獻(xiàn)求助 (8)
- >公派出國(guó) (4)
- >綠色求助(高懸賞) (3)
- >教師之家 (3)
- >碩博家園 (3)
- >休閑灌水 (3)
- >論文道賀祈福 (2)
- >基金申請(qǐng) (2)
- >論文投稿 (2)
- >育兒交流 (1)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2459 | 回復(fù): 15 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | |||
聽(tīng)雪看山木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
西游家族之T所長(zhǎng)
|
[交流]
【求助/交流】單酶切載體竟然沒(méi)切開(kāi)，尋求原因？？ 已有5人參與
|
||
|
我用的載體是5500bp，酶是XmaI，去過(guò)磷酸化的。這個(gè)酶切已經(jīng)做過(guò)n多次了，插入基因就是沒(méi)辦法和載體連接上，自連現(xiàn)象嚴(yán)重。當(dāng)時(shí)以為是去磷酸化步驟的問(wèn)題，然后就做過(guò)2次去磷酸化。 后來(lái)在做完酶切后做了一個(gè)轉(zhuǎn)化，將50ng酶切液用電子穿孔儀轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞，隔夜培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)n多菌斑，那就是意味著沒(méi)有酶切成功，心里這個(gè)郁悶��！ 我用的這個(gè)酶據(jù)說(shuō)是比較難反應(yīng)的，所以當(dāng)時(shí)酶切都是隔夜至少10個(gè)小時(shí)以上了��！ 我現(xiàn)在真的是一點(diǎn)辦法也沒(méi)有了，本來(lái)就是新手，第一次做，竟然還碰到這么大的問(wèn)題，3個(gè)月了，一點(diǎn)進(jìn)展都沒(méi)有，著急啊！ 懇請(qǐng)高手們給點(diǎn)建議，小蝦米在這多謝了！！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有293人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線(xiàn)
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 載體單酶切后去磷酸化還會(huì)自連嗎？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 關(guān)于xba I單酶切后的TA連接
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 表達(dá)載體雙酶切
已經(jīng)有9人回復(fù)
- Eco88l單酶切pUC18，失敗原因及解決辦法？？？？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 載體酶切
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 質(zhì)粒單酶切出現(xiàn)兩條帶
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】大家酶切載體的時(shí)候回收完了用不用堿性磷酸酶處理啊？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】xho1單酶切，總連不上(片段3K,載體5K)
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】片段轉(zhuǎn)進(jìn)去，提質(zhì)粒酶切發(fā)現(xiàn)載體小了，想不明白
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒單酶切后竟然兩條帶
已經(jīng)有32人回復(fù)
- 【求助/交流】大家酶切載體怎么切？一般切多久？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【分享】關(guān)于載體雙酶切的一些經(jīng)驗(yàn)
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于克隆連接
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】單酶切連接的克隆急……
已經(jīng)有10人回復(fù)
聽(tīng)雪看山
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
西游家族之T所長(zhǎng)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 貴賓: 1.037
- 金幣: 2112.6
- 散金: 3557
- 紅花: 43
- 沙發(fā): 3
- 帖子: 3644
- 在線(xiàn): 445.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 509830
- 注冊(cè): 2008-02-23
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)
3樓2010-02-08 22:25:47
gyesang
榮譽(yù)版主 (著名寫(xiě)手)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +24 - MolEPI: 31
- 應(yīng)助: 599 (博士)
- 貴賓: 2.689
- 金幣: 24334.9
- 散金: 1088
- 紅花: 88
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 2327
- 在線(xiàn): 623.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 849017
- 注冊(cè): 2009-09-16
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
- 管轄: 分子生物
2樓2010-02-08 22:04:25
4樓2010-02-09 01:22:17
yang0071
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 207 (大學(xué)生)
- 金幣: 1573.4
- 散金: 9319
- 紅花: 21
- 帖子: 4041
- 在線(xiàn): 647.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 50941
- 注冊(cè): 2004-07-15
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
5樓2010-02-09 10:51:07
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +6 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | A_JiXing 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，總分315，考的生物醫(yī)藥，一志愿湖南師范大學(xué)。調(diào)劑到任何專(zhuān)業(yè)都可以 +4 | 小丁想進(jìn)步 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自動(dòng)化所實(shí)習(xí) +6 | Losir 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +6 | 步川酷紫123 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料與化工一志愿南昌大學(xué)327求調(diào)劑推薦 +7 | Ncdx123456 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 22408總分284求調(diào)劑 +3 | InAspic 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑 +3 | Zys010410@ 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料工程327求調(diào)劑 +3 | xiaohe12w 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科院，化學(xué)方向，295求調(diào)劑 +4 | 一氧二氮 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | Mochaaaa 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑一志愿 985 總分 295 +8 | dream…… 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 7712b 2026-03-13 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 一定有學(xué)上- 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 小匕仔汁 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ADT 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑（食品/專(zhuān)碩） +3 | xc321 2026-03-12 | 6/300 |
|