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hlznd02金蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】電泳分離膠pH的問題 已有6人參與
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| 跑電泳時(shí)分離膠的Tris-HCl的pH不到8.8對(duì)結(jié)果有什么影響嗎？原理是什么？急。。。謝謝！ |
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scelab
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2樓2010-12-11 23:29:37
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
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不知道是低多少？低一點(diǎn)的話，影響應(yīng)該不是很大，但是，差的太多，會(huì)影響蛋白條帶的分離效果。 至于原理嘛， SDS-PAGE制膠用的Tris-HCL緩沖液，濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.8。電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖液。 當(dāng)樣品從濃縮膠進(jìn)入分離膠后，由于膠中pH的增加，呈堿性，甘氨酸大量解離，泳動(dòng)速率增加，直接緊隨氯離子之后，同時(shí)由于分離膠孔徑的縮小，在電場(chǎng)的作用下，蛋白分子根據(jù)其固有的帶電性和分子大小進(jìn)行分離。 |
3樓2010-12-12 00:25:04
2009227004
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7樓2011-06-29 15:46:03
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