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wolaiyefeng鐵桿木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于雙酶切位點(diǎn)的選擇及其條件
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求助:請(qǐng)問(wèn)有誰(shuí)知道雙酶切位點(diǎn)選擇時(shí)應(yīng)該考慮哪些方面的因素。苛硗馊绻x擇的某一酶切位點(diǎn)事甲基化了的話(huà),對(duì)酶連 有什么影響??? [ Last edited by wolaiyefeng on 2011-4-25 at 22:39 ] |
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木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
我們是糖 甜到憂(yōu)傷
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首先你所選的兩個(gè)酶切在你的基因中不要存在。 其次如果用那些酶切buffer還有N多種的那些酶的話(huà),得考慮buffer的兼容性。(其實(shí)現(xiàn)在很多酶都用通用的buffer了。) 如果選擇的某一酶切位點(diǎn)甲基化,可能會(huì)導(dǎo)致酶切不動(dòng),你就找甲基化缺陷型菌株轉(zhuǎn)質(zhì)粒,提質(zhì)粒,再切吧。(會(huì)出現(xiàn)這問(wèn)題嗎?沒(méi)遇到過(guò)啊。) PS:樓上打廣告,等咔嚓咔嚓吧。 |

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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