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wolaiyefeng鐵桿木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于雙酶切位點(diǎn)的選擇及其條件
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求助：請(qǐng)問(wèn)有誰(shuí)知道雙酶切位點(diǎn)選擇時(shí)應(yīng)該考慮哪些方面的因素啊？另外如果選擇的某一酶切位點(diǎn)事甲基化了的話，對(duì)酶連 有什么影響？？？ [ Last edited by wolaiyefeng on 2011-4-25 at 22:39 ] |
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wolaiyefeng(金幣+1): 非常感謝�。�！ 2011-04-26 15:53:43
西瓜:編輯內(nèi)容 2011-04-26 17:18
西瓜:編輯內(nèi)容 2011-04-26 17:18
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2011-04-26 10:55:35
susizheng
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
我們是糖 甜到憂傷
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【答案】應(yīng)助回帖
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西瓜(金幣+3): 鼓勵(lì)交流 2011-04-26 19:04:44
西瓜(金幣+3): 鼓勵(lì)交流 2011-04-26 19:04:44
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首先你所選的兩個(gè)酶切在你的基因中不要存在。 其次如果用那些酶切buffer還有N多種的那些酶的話，得考慮buffer的兼容性。（其實(shí)現(xiàn)在很多酶都用通用的buffer了。） 如果選擇的某一酶切位點(diǎn)甲基化，可能會(huì)導(dǎo)致酶切不動(dòng)，你就找甲基化缺陷型菌株轉(zhuǎn)質(zhì)粒，提質(zhì)粒，再切吧。（會(huì)出現(xiàn)這問(wèn)題嗎？沒(méi)遇到過(guò)啊。） PS：樓上打廣告，等咔嚓咔嚓吧。  |
3樓2011-04-26 17:07:44
cxl_yll
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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4樓2011-04-26 22:10:59
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