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——CODEHOP簡(jiǎn)并引物設(shè)計(jì)程序的疑惑
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想設(shè)計(jì)某未測(cè)序的線蟲CM基因的簡(jiǎn)并引物,從NCBI上下載了幾種其他線蟲的CM基因氨基酸序列,通過(guò)Block Maker搜保守區(qū)(其實(shí)我是沒弄會(huì)這個(gè)在線程序,所以通過(guò)DNAstar的Megalign by Clustal W method,再用Block Maker網(wǎng)址上Multiple Alignment Processor進(jìn)行做的)CODEHOP結(jié)果顯示“No suggested primers found.” 請(qǐng)問(wèn)會(huì)設(shè)計(jì)的朋友給點(diǎn)建議,該怎么辦? |


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請(qǐng)問(wèn)設(shè)計(jì)兼并 引物參考NDA序列還是氨基酸序列?因?yàn)槲覍⒖嫉膸讞lDNA序列進(jìn)行比對(duì),發(fā)現(xiàn)在對(duì)應(yīng)的保守序列中對(duì)應(yīng)的氨基酸都是同一種密碼子決定的,如果引物中使用這種密碼子,兼并度會(huì)低很多,但如果將一條氨基酸序列輸入primer 5,再翻譯成DNA。這樣在保守區(qū)的設(shè)計(jì)的兼并引物兼并度很高。 我第一次設(shè)計(jì)兼并引物,實(shí)驗(yàn)室也沒人設(shè)計(jì)過(guò),只是從網(wǎng)上看到一些教程學(xué)的。這個(gè)問(wèn)題一直困擾著我,還請(qǐng)大俠指教。 |

銀蟲 (初入文壇)
銀蟲 (初入文壇)
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