 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4734 | 回復(fù): 17 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
lx19880717金蟲 (初入文壇)
|
[求助]
pET-28a原核不能表達(dá)目的蛋白 已有2人參與
|
||
|
我在做原核表達(dá)的過程中，使用了pET-28a載體，Rosetta（DE3）表達(dá)菌株，但是37℃誘導(dǎo)表達(dá)后，連包涵體都沒有看到，基本沒有任何的蛋白表達(dá)，所以想請問一下大家，能不能幫我分析一下是什么原因？謝謝。 PS：我的目的蛋白大量重復(fù)序列，是否是由于重復(fù)序列導(dǎo)致蛋白在表達(dá)過程中無法折疊，如果是這個原因有什么辦法可以解決，謝謝。 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 分子問題及解決方案匯總 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有132人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 目的蛋白序列連接pet15b測序結(jié)果正確為何不表達(dá)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 原核表達(dá) PET-30載體 目的蛋白分子量偏��？
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 關(guān)于用Ni-NTA His.bind樹脂純化原核表達(dá)蛋白
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白誘導(dǎo)不出來
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達(dá)系統(tǒng)不表達(dá)目的蛋白
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 原核同時表達(dá)兩個蛋白，需要自行給其中一個加標(biāo)簽，請教了�。�！
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】請問pet28a表達(dá)的蛋白一定是細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的么？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于PEt-28a質(zhì)粒載體表達(dá)蛋白質(zhì)的問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】（引物設(shè)計）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影響目的基因的表達(dá)？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】離子交換純化原核表達(dá)蛋白
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)蛋白分子量偏大
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白降解 有效期到2010.8.5
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
太極拳
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 20 (小學(xué)生)
- 金幣: 2851.8
- 散金: 10
- 帖子: 148
- 在線: 82.3小時
- 蟲號: 588650
- 注冊: 2008-08-29
- 專業(yè): 生物化學(xué)
10樓2012-04-10 10:04:48
2樓2012-03-12 16:58:46
lx19880717
金蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 858
- 帖子: 8
- 在線: 9.8小時
- 蟲號: 987705
- 注冊: 2010-04-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2012-03-12 20:33:16
zhiqiang5070
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 2711.4
- 散金: 66
- 紅花: 1
- 帖子: 459
- 在線: 117小時
- 蟲號: 743352
- 注冊: 2009-04-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜(金幣+2): 鼓勵交流 2012-03-14 22:15:48
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜(金幣+2): 鼓勵交流 2012-03-14 22:15:48
|
我跟你一樣，也是用的PET28a，不過我用的菌是BL21。 1.你先到上游看看，是不是載體構(gòu)建的問題；菌p，提質(zhì)粒酶切，測序看看。 2.上游沒問題的話，改變誘導(dǎo)條件試試，T7lac啟動子用IPTG1mM誘導(dǎo)6小時看看； 3你的菌有沒有問題，可以把構(gòu)建的重組載體提出來轉(zhuǎn)化到新的感受態(tài)試試，我的問題就是這么解決滴  4.換高濃度膠跑跑看看，高濃度提高分辨率。 |
4樓2012-03-14 17:49:04
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[基金申請] 被我言中：新模板不強(qiáng)調(diào)格式了，假專家開始管格式了 +4 | beefly 2026-03-14 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名 +3 | 脫穎而出 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級已過，有科研經(jīng)歷 +8 | 曦熙兮 2026-03-15 | 8/400 |
|
|
[考研] 344求調(diào)劑 +4 | knight344 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工求調(diào)劑 +5 | 緒幸與子 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +7 | 邱gl 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 東南大學(xué)364求調(diào)劑 +5 | JasonYuiui 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0854控制工程 359求調(diào)劑 可跨專業(yè) +3 | 626776879 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +6 | 大可digkids 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +5 | 素年祭語 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 求調(diào)劑 +13 | enenenhui 2026-03-13 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 材料與化工一志愿南昌大學(xué)327求調(diào)劑推薦 +7 | Ncdx123456 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學(xué)員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +6 | 邱gl 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 球球古力 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +7 | 綠豆芹菜湯 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑（食品/專碩） +3 | xc321 2026-03-12 | 6/300 |
|