 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4736 | 回復(fù): 17 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
lx19880717金蟲 (初入文壇)
|
[求助]
pET-28a原核不能表達目的蛋白 已有2人參與
|
||
|
我在做原核表達的過程中，使用了pET-28a載體，Rosetta（DE3）表達菌株，但是37℃誘導(dǎo)表達后，連包涵體都沒有看到，基本沒有任何的蛋白表達，所以想請問一下大家，能不能幫我分析一下是什么原因？謝謝。 PS：我的目的蛋白大量重復(fù)序列，是否是由于重復(fù)序列導(dǎo)致蛋白在表達過程中無法折疊，如果是這個原因有什么辦法可以解決，謝謝。 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 分子問題及解決方案匯總 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有238人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 目的蛋白序列連接pet15b測序結(jié)果正確為何不表達
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 原核表達 PET-30載體 目的蛋白分子量偏��？
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 關(guān)于用Ni-NTA His.bind樹脂純化原核表達蛋白
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達蛋白誘導(dǎo)不出來
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達系統(tǒng)不表達目的蛋白
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 原核同時表達兩個蛋白，需要自行給其中一個加標(biāo)簽，請教了�。�！
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】請問pet28a表達的蛋白一定是細胞內(nèi)表達的么？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于PEt-28a質(zhì)粒載體表達蛋白質(zhì)的問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】（引物設(shè)計）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影響目的基因的表達？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】離子交換純化原核表達蛋白
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達蛋白分子量偏大
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 原核表達蛋白降解 有效期到2010.8.5
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
胡亂走走2011
銀蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 8269.5
- 散金: 365
- 紅花: 11
- 帖子: 1423
- 在線: 356.4小時
- 蟲號: 1453727
- 注冊: 2011-10-21
- 性別: MM
- 專業(yè): 免疫生物學(xué)
9樓2012-04-07 08:39:30
2樓2012-03-12 16:58:46
lx19880717
金蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 858
- 帖子: 8
- 在線: 9.8小時
- 蟲號: 987705
- 注冊: 2010-04-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2012-03-12 20:33:16
zhiqiang5070
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 2711.4
- 散金: 66
- 紅花: 1
- 帖子: 459
- 在線: 117小時
- 蟲號: 743352
- 注冊: 2009-04-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜(金幣+2): 鼓勵交流 2012-03-14 22:15:48
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜(金幣+2): 鼓勵交流 2012-03-14 22:15:48
|
我跟你一樣，也是用的PET28a，不過我用的菌是BL21。 1.你先到上游看看，是不是載體構(gòu)建的問題；菌p，提質(zhì)粒酶切，測序看看。 2.上游沒問題的話，改變誘導(dǎo)條件試試，T7lac啟動子用IPTG1mM誘導(dǎo)6小時看看； 3你的菌有沒有問題，可以把構(gòu)建的重組載體提出來轉(zhuǎn)化到新的感受態(tài)試試，我的問題就是這么解決滴  4.換高濃度膠跑跑看看，高濃度提高分辨率。 |
4樓2012-03-14 17:49:04
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +9 | 小熊joy 2026-03-14 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +4 | 陌宸希 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +6 | 步川酷紫123 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +7 | 邱gl 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +3 | lemonzzn 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0854控制工程 359求調(diào)劑 可跨專業(yè) +3 | 626776879 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +4 | 這么名字咋樣 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【0703化學(xué)調(diào)劑】-一志愿華中師范大學(xué)-六級475 +5 | Becho359 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 招收0805（材料）調(diào)劑 +3 | 18595523086 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +6 | 邱gl 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑（材料與化工327） +4 | 愛吃香菜啦 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 085600英一數(shù)二總分302 前三科235 精通機器學(xué)習(xí) 一志愿哈工大 +4 | 林yaxin 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 +5 | 隔壁陳先生 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 26調(diào)劑/材料/英一數(shù)二/總分289/已過A區(qū)線 +6 | 步川酷紫123 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 工科278分求調(diào)劑 +5 | 周慢熱啊 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 是Lupa啊 2026-03-12 | 3/150 |
|