 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 8890 | 回復(fù): 7 | |||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||||
[求助]
熒光定量PCR的擴(kuò)增曲線很奇怪，什么原因 已有2人參與
|
|||||
|
第一次做熒光定量PCR，得到的擴(kuò)增曲線很奇怪，不知道是什么原因，求指教！還有要是CT值過高是不是應(yīng)該增加模板的濃度�。� |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) | 【分子生物】EPI帖 | 觀-精-記 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有104人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
天津商業(yè)大學(xué) 生物與醫(yī)藥課題組招生
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 救命啊！熒光定量PCR 擴(kuò)增問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 熒光定量PCR擴(kuò)增效率怎么做？？？？我要被逼瘋了
已經(jīng)有17人回復(fù)
- Taqman實(shí)時(shí)熒光定量PCR本地信號(hào)過強(qiáng)是什么原因？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 求高手解救熒光定量的問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 熒光定量PCR與普通PCR產(chǎn)物不一樣？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 標(biāo)準(zhǔn)菌株建立熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量pcr出現(xiàn)直線擴(kuò)增曲線，求指導(dǎo)
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【分享】熒光定量PCR簡(jiǎn)介
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光PCR擴(kuò)增曲線問題
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量PCR曲線分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【分享】熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)指南（二）
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【分享】熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)指南（一）
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量pcr
已經(jīng)有11人回復(fù)
atlanticwi
金蟲 (正式寫手)
琴美喜歡發(fā)呆 不喜歡發(fā)脾氣
- MolEPI: 25
- 應(yīng)助: 138 (高中生)
- 金幣: 141.2
- 散金: 350
- 紅花: 13
- 帖子: 536
- 在線: 313.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1099992
- 注冊(cè): 2010-09-15
- 專業(yè): 植物生理與生化
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜: 金幣+5, MolEPI+1, 最近很犀利啊~Real-time產(chǎn)物跑膠是可行的，我自己也做過，嘿嘿~ 2012-03-28 11:12:13
西瓜: 金幣+5, MolEPI+1, 最近很犀利啊~Real-time產(chǎn)物跑膠是可行的，我自己也做過，嘿嘿~ 2012-03-28 11:12:13
|
嗯..... 個(gè)人看法： 為什么大家把溶解曲線看的這么重要呢，我覺得本末倒置了，若是你的擴(kuò)增曲線都沒有再一定范圍內(nèi)起峰的話，溶解曲線即使是單一峰又有什么用呢？況且你還要看峰的尖銳程度，峰的高低。我就說這么幾個(gè)例子吧： 1. 以前用某樂的96-microplate，總在77~80度左右有單一小側(cè)峰，考慮引物問題等眾多事情后仍舊無解，最后同樣實(shí)驗(yàn)條件使用某A的8-Strip tube，前邊的雜峰消除。 2. 做過NTC，發(fā)現(xiàn)三重復(fù)都在38Ct時(shí)左右起峰，溶解曲線很單一，與內(nèi)參同溫度，但峰最高值是其一半左右，至今仍無解。 所以你只能有擴(kuò)增才能用溶解來證明是不是擴(kuò)增正確，而不能沒擴(kuò)增卻用溶解來說明有擴(kuò)增，如果實(shí)在不放心，那就那擴(kuò)增產(chǎn)物跑膠，理論可行，但我沒有試過。 那個(gè)闕值線的問題，你可以參照偶回答的帖子 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4305783&authorid=1099992 祝實(shí)驗(yàn)順利  如有說錯(cuò)，請(qǐng)高手指點(diǎn) |
4樓2012-03-28 09:47:03
atlanticwi
金蟲 (正式寫手)
琴美喜歡發(fā)呆 不喜歡發(fā)脾氣
- MolEPI: 25
- 應(yīng)助: 138 (高中生)
- 金幣: 141.2
- 散金: 350
- 紅花: 13
- 帖子: 536
- 在線: 313.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1099992
- 注冊(cè): 2010-09-15
- 專業(yè): 植物生理與生化
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜: 金幣+4, 很熱心很耐心！個(gè)人也認(rèn)為是無擴(kuò)增…… 2012-03-28 11:10:23
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜: 金幣+4, 很熱心很耐心！個(gè)人也認(rèn)為是無擴(kuò)增…… 2012-03-28 11:10:23
|
嗯........................ 我是這樣認(rèn)為的： 你看到那個(gè)紅色的線了嗎，那應(yīng)該是闕值線，如果你沒有手動(dòng)調(diào)整過的話，在闕值線以下的都是背景雜信號(hào)，忽上忽下的很正常，后邊沒有在一定范圍內(nèi)起峰，說明是無產(chǎn)物擴(kuò)增的，如果你用的SYBR Green I 法，也同時(shí)會(huì)有溶解曲線分析吧，若那里邊也是沒有很尖銳的峰出現(xiàn)（我這里是籠統(tǒng)的說法），只能說明你這個(gè)擴(kuò)增是沒有產(chǎn)物出現(xiàn)的。而且你圖不是很清晰，看不清楚縱軸是什么標(biāo)示。 問題很多，不能在這一概而就的說明 希望有所幫助，如果有說錯(cuò)地方，請(qǐng)各位高手指點(diǎn) |
2樓2012-03-27 20:27:47
3樓2012-03-28 09:05:33
5樓2012-03-28 10:24:39
doglet
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 14 (小學(xué)生)
- 金幣: 1854.2
- 帖子: 59
- 在線: 17.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 2307526
- 注冊(cè): 2013-02-28
- 專業(yè): 預(yù)防醫(yī)學(xué)其他科學(xué)問題
6樓2013-11-13 14:55:56
wskiddy
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 15.8
- 帖子: 3
- 在線: 46分鐘
- 蟲號(hào): 3317717
- 注冊(cè): 2014-07-10
- 專業(yè): 病毒學(xué)
7樓2014-07-10 22:22:38
8樓2015-04-24 10:29:54
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 杜越歐 的主題更新
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +3 | 吳彥祖24k 2026-04-02 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 805600專碩材料與化工348分求調(diào)劑 +6 | 上學(xué)啦！ 2026-04-01 | 6/300 |
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +14 | 勒布朗@ 2026-03-31 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 0703一志愿南師大334求調(diào)劑 +4 | seven7yu 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 262求調(diào)劑 +9 | 勵(lì)志一定發(fā)文章 2026-03-31 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085900土木水利336分求調(diào)劑 +3 | Zhangjiangj 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 土木304求調(diào)劑 +5 | 頂級(jí)擦擦 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +13 | 深V宿舍吧 2026-03-29 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +9 | 楒桉 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)，080500學(xué)碩，317分，求調(diào)劑 +9 | s1145 2026-03-31 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 08開頭看過來�。�！ +3 | wwwwffffff 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 一志愿哈工大總分298分，前三科223分 +11 | dongfang59 2026-03-27 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 315求調(diào)劑 +6 | akie... 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 +16 | kikiki7 2026-03-30 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 323分 食品與營(yíng)養(yǎng)調(diào)劑 +3 | 嘿ooo 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 青春裁為三截 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +4 | 蝶舞輕繞 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 崔wj 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 331環(huán)境科學(xué)與工程求調(diào)劑 +3 | 熠然好運(yùn)氣 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 崔wj 2026-03-26 | 4/200 |
|