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挑取單菌落的問(wèn)題 已有4人參與
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挑取單菌落到試管中搖菌,我們實(shí)驗(yàn)室用的是挑取單菌落到5ml左右YEB液體培養(yǎng)基的試管中。配YEB的時(shí)候一般都是配制在50ml錐形瓶中,之后挑取單菌落的話只用5ml左右(師兄說(shuō)也還可以多加點(diǎn),都可以),那各位加抗生素是加到50ml的液體培養(yǎng)基中混勻后再轉(zhuǎn)到試管中5ml左右的YEB液體培養(yǎng)基,還是直接量取5ml的YEB培養(yǎng)基到試管中再加入抗生素?要是先加抗生素再轉(zhuǎn)移之后會(huì)剩下很多YEB液體培養(yǎng)基,如果里面加了抗生素的話也相當(dāng)于浪費(fèi)了很多抗生素。我又問(wèn)了師兄說(shuō)加了抗生素的液體培養(yǎng)基可以保存嗎,他說(shuō)一周左右就失效了,只能沒(méi)用完的就倒了,我感覺(jué)好浪費(fèi)哦!我們實(shí)驗(yàn)室都是這么做的,請(qǐng)問(wèn)各位蟲(chóng)友們都是怎么做的? [ Last edited by yangsirun on 2012-4-11 at 18:25 ] |


鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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如果先分裝培養(yǎng)基再加抗生素的話,由于加入的抗生素量少,會(huì)造成誤差,但一般有點(diǎn)誤差對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響不會(huì)很大,我一般都是分裝為5ml以后再加抗生素。 如果近期用的抗性培養(yǎng)基比較多的話,也可以事先加到整體的培養(yǎng)基中。 抗生素失效的問(wèn)題:這還得看抗生素的種類(lèi)。比如kan就沒(méi)有關(guān)系,甚至高壓滅菌也不會(huì)失效。最常見(jiàn)失效的是氨芐青霉素,一般都現(xiàn)用現(xiàn)價(jià)。而且在做轉(zhuǎn)化時(shí),培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí)氨芐平板上會(huì)形成衛(wèi)星菌落,所以我們現(xiàn)在一般都盡量避免使用amp。 |

專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
T.Shen
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