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挑取單菌落的問題 已有4人參與
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挑取單菌落到試管中搖菌，我們實(shí)驗(yàn)室用的是挑取單菌落到5ml左右YEB液體培養(yǎng)基的試管中。配YEB的時候一般都是配制在50ml錐形瓶中，之后挑取單菌落的話只用5ml左右（師兄說也還可以多加點(diǎn)，都可以），那各位加抗生素是加到50ml的液體培養(yǎng)基中混勻后再轉(zhuǎn)到試管中5ml左右的YEB液體培養(yǎng)基，還是直接量取5ml的YEB培養(yǎng)基到試管中再加入抗生素？要是先加抗生素再轉(zhuǎn)移之后會剩下很多YEB液體培養(yǎng)基，如果里面加了抗生素的話也相當(dāng)于浪費(fèi)了很多抗生素。我又問了師兄說加了抗生素的液體培養(yǎng)基可以保存嗎，他說一周左右就失效了，只能沒用完的就倒了，我感覺好浪費(fèi)哦！我們實(shí)驗(yàn)室都是這么做的，請問各位蟲友們都是怎么做的？ [ Last edited by yangsirun on 2012-4-11 at 18:25 ] |
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9樓2012-04-13 09:43:25
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如果先分裝培養(yǎng)基再加抗生素的話，由于加入的抗生素量少，會造成誤差，但一般有點(diǎn)誤差對細(xì)菌生長的影響不會很大，我一般都是分裝為5ml以后再加抗生素。 如果近期用的抗性培養(yǎng)基比較多的話，也可以事先加到整體的培養(yǎng)基中。 抗生素失效的問題：這還得看抗生素的種類。比如kan就沒有關(guān)系，甚至高壓滅菌也不會失效。最常見失效的是氨芐青霉素，一般都現(xiàn)用現(xiàn)價。而且在做轉(zhuǎn)化時，培養(yǎng)時間過長時氨芐平板上會形成衛(wèi)星菌落，所以我們現(xiàn)在一般都盡量避免使用amp。 |
2樓2012-04-11 18:41:19
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4樓2012-04-11 21:56:41
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