 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4598 | 回復(fù): 4 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點擊這里進行查看 | |||
[求助]
構(gòu)建質(zhì)粒時 質(zhì)粒上的ATG與目的基因ATG 的問題
|
|||
|
不知道各位在構(gòu)建質(zhì)粒時，遇到這種情況： Nco I 位點處含有ATG密碼子時，使用的酶切位點為 B、C兩處，目的基因正向引物序列ACTCGAATCCATGGCAAGTTCG。 在氨基酸序列翻譯時，是從A處的ATG開始，而B處的ATG閱讀框發(fā)生改變？ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有117人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- pMD18-T載體與目的基因連接后構(gòu)建的質(zhì)粒能通過接合轉(zhuǎn)移到一些難以轉(zhuǎn)化的細菌中嗎？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 關(guān)于農(nóng)桿菌單菌株/雙質(zhì)粒表達載體的構(gòu)建問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 新提的質(zhì)粒DNA，關(guān)于濃度和純度蟲友們發(fā)表一些看法吧
已經(jīng)有32人回復(fù)
- 新手求助——質(zhì)粒電泳條帶問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 熒光定量PCR中模板采用直接提取的DNA與構(gòu)建目標(biāo)片段質(zhì)粒模板有什么區(qū)別？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒構(gòu)建疑難問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 熒光素酶報告基因的內(nèi)參質(zhì)粒選擇
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】構(gòu)建質(zhì)粒問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒跟目的基因連接不上怎么辦
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】（引物設(shè)計）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影響目的基因的表達？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化中，Ca離子的作用問題.謝謝！
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于質(zhì)粒構(gòu)建與表達的問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
- 貴賓: 0.238
- 金幣: 17138.7
- 紅花: 43
- 帖子: 2251
- 在線: 712.4小時
- 蟲號: 111074
- 注冊: 2005-11-20
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2012-04-26 20:20:45
susizheng
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 130 (高中生)
- 貴賓: 0.008
- 金幣: 4738.3
- 散金: 2273
- 紅花: 56
- 帖子: 2308
- 在線: 740.7小時
- 蟲號: 642666
- 注冊: 2008-11-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 有機合成
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜: 金幣+5, MolEPI+1, Good！ 2012-04-26 22:06:12
Diacetyl: 金幣+2, ★★★很有幫助 2012-04-27 13:43:56
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜: 金幣+5, MolEPI+1, Good！ 2012-04-26 22:06:12
Diacetyl: 金幣+2, ★★★很有幫助 2012-04-27 13:43:56
|
有這么幾個問題， 1，EcoRI 酶切位點是GAATTC,不是GAATCC，估計是手誤。記得不要犯這種錯誤哦，不然引物合成出來，載體構(gòu)建不成功都還知道是什么原因。 2，翻譯是從載體上ATG開始的，即是你標(biāo)記的A處，所以你的引物設(shè)計應(yīng)該在酶切位點后面加一個G，即GAATTC-G，這樣才能保證你的基因不移碼。 3，既然翻譯從載體上的ATG開始的，所以酶切位點后面可以不用再加你基因的ATG了。 4，EcoRI 酶切位點的保護堿基是CCG，當(dāng)然也有人說可以隨便加堿基，但個人認(rèn)為竟然有保護堿基表，還是按照標(biāo)準(zhǔn)來。 所以引物應(yīng)該是：CCG-GAATTC-G-GCAAGTTCG（后面再補幾個堿基吧，至少18個堿基配對啊，才9個，太摳了吧） |
3樓2012-04-26 20:27:19
4樓2012-04-27 13:43:19
susizheng
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 130 (高中生)
- 貴賓: 0.008
- 金幣: 4738.3
- 散金: 2273
- 紅花: 56
- 帖子: 2308
- 在線: 740.7小時
- 蟲號: 642666
- 注冊: 2008-11-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 有機合成
5樓2012-04-27 21:02:10
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 Diacetyl 的主題更新
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +11 | zjl的號 2026-03-16 | 16/800 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | △小透明* 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +6 | 世界首富 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +3 | 困于星晨 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 285化工學(xué)碩求調(diào)劑（081700） +9 | 柴郡貓_ 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +5 | 時間點 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | ahbd 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留 +8 | 秋有木北 2026-03-14 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑 +3 | Zys010410@ 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 331求調(diào)劑（0703有機化學(xué) +5 | ZY-05 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +5 | 是Lupa啊 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑（材料與化工327） +4 | 愛吃香菜啦 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[碩博家園] 085600 260分求調(diào)劑 +3 | 天空還下雨么 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +7 | 綠豆芹菜湯 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +8 | 困于星晨 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿211化學(xué)學(xué)碩310分求調(diào)劑 +8 | 努力奮斗112 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料301分求調(diào)劑 +5 | Liyouyumairs 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化工學(xué)碩306求調(diào)劑 +9 | 42838695 2026-03-12 | 9/450 |
|