 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4620 | 回復(fù): 4 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
構(gòu)建質(zhì)粒時(shí) 質(zhì)粒上的ATG與目的基因ATG 的問題
|
|||
|
不知道各位在構(gòu)建質(zhì)粒時(shí)，遇到這種情況： Nco I 位點(diǎn)處含有ATG密碼子時(shí)，使用的酶切位點(diǎn)為 B、C兩處，目的基因正向引物序列ACTCGAATCCATGGCAAGTTCG。 在氨基酸序列翻譯時(shí)，是從A處的ATG開始，而B處的ATG閱讀框發(fā)生改變？ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有130人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- pMD18-T載體與目的基因連接后構(gòu)建的質(zhì)粒能通過接合轉(zhuǎn)移到一些難以轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中嗎？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 關(guān)于農(nóng)桿菌單菌株/雙質(zhì)粒表達(dá)載體的構(gòu)建問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 新提的質(zhì)粒DNA，關(guān)于濃度和純度蟲友們發(fā)表一些看法吧
已經(jīng)有32人回復(fù)
- 新手求助——質(zhì)粒電泳條帶問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 熒光定量PCR中模板采用直接提取的DNA與構(gòu)建目標(biāo)片段質(zhì)粒模板有什么區(qū)別？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒構(gòu)建疑難問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 熒光素酶報(bào)告基因的內(nèi)參質(zhì)粒選擇
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】構(gòu)建質(zhì)粒問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒跟目的基因連接不上怎么辦
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】（引物設(shè)計(jì)）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影響目的基因的表達(dá)？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化中，Ca離子的作用問題.謝謝！
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于質(zhì)粒構(gòu)建與表達(dá)的問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
susizheng
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 130 (高中生)
- 貴賓: 0.008
- 金幣: 4738.3
- 散金: 2273
- 紅花: 56
- 帖子: 2308
- 在線: 740.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 642666
- 注冊(cè): 2008-11-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 有機(jī)合成
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜: 金幣+5, MolEPI+1, Good！ 2012-04-26 22:06:12
Diacetyl: 金幣+2, ★★★很有幫助 2012-04-27 13:43:56
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西瓜: 金幣+5, MolEPI+1, Good！ 2012-04-26 22:06:12
Diacetyl: 金幣+2, ★★★很有幫助 2012-04-27 13:43:56
|
有這么幾個(gè)問題， 1，EcoRI 酶切位點(diǎn)是GAATTC,不是GAATCC，估計(jì)是手誤。記得不要犯這種錯(cuò)誤哦，不然引物合成出來，載體構(gòu)建不成功都還知道是什么原因。 2，翻譯是從載體上ATG開始的，即是你標(biāo)記的A處，所以你的引物設(shè)計(jì)應(yīng)該在酶切位點(diǎn)后面加一個(gè)G，即GAATTC-G，這樣才能保證你的基因不移碼。 3，既然翻譯從載體上的ATG開始的，所以酶切位點(diǎn)后面可以不用再加你基因的ATG了。 4，EcoRI 酶切位點(diǎn)的保護(hù)堿基是CCG，當(dāng)然也有人說可以隨便加堿基，但個(gè)人認(rèn)為竟然有保護(hù)堿基表，還是按照標(biāo)準(zhǔn)來。 所以引物應(yīng)該是：CCG-GAATTC-G-GCAAGTTCG（后面再補(bǔ)幾個(gè)堿基吧，至少18個(gè)堿基配對(duì)啊，才9個(gè)，太摳了吧） |
3樓2012-04-26 20:27:19
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
- 貴賓: 0.238
- 金幣: 17138.7
- 紅花: 43
- 帖子: 2251
- 在線: 712.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 111074
- 注冊(cè): 2005-11-20
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2012-04-26 20:20:45
4樓2012-04-27 13:43:19
susizheng
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 130 (高中生)
- 貴賓: 0.008
- 金幣: 4738.3
- 散金: 2273
- 紅花: 56
- 帖子: 2308
- 在線: 740.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 642666
- 注冊(cè): 2008-11-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 有機(jī)合成
5樓2012-04-27 21:02:10
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +8 | 呢呢妮妮 2026-04-01 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0703化學(xué)338求調(diào)劑！ +8 | Zuhui0306 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 310分求調(diào)劑 +4 | 成功上岸wang 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600 一志愿9 總分351 求調(diào)劑學(xué)校 +7 | czhcz 2026-03-31 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料工程290求調(diào)劑 +18 | Youth_ 2026-03-30 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 一志愿北交大材料工程總分358 +7 | cs0106 2026-04-01 | 8/400 |
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +9 | 舟自梗 2026-04-01 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 08工科275求調(diào)劑，可跨考。 +5 | AaAa7420 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +8 | y-yh 2026-04-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +9 | A child 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +7 | 曲聽筠 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)，080500學(xué)碩，317分，求調(diào)劑 +9 | s1145 2026-03-31 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 08開頭看過來�。�！ +3 | wwwwffffff 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 崔wj 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 材料專業(yè)申博 +5 | 杜雨婷dyt 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 083000學(xué)碩274求調(diào)劑 +12 | Li李魚 2026-03-26 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +12 | j的立方 2026-03-29 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +8 | 嗯滴的基本都 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +5 | Sanmu-124 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 本科新能源科學(xué)與工程，一志愿華理能動(dòng)285求調(diào)劑 +3 | AZMK 2026-03-27 | 5/250 |
|