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shengnan1987鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
帶HIS標(biāo)簽的可溶蛋白的純化問題
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我做的是一種蛋白酶的原核表達(dá)，c端帶一個his標(biāo)簽，大小31kd，等電點10，pet24a可溶表達(dá)，但表達(dá)量不高，不到50%，用鎳柱純化，Binding: 20 mM sodium phosphate, 20 mM Imidazole,500 mM NaCl, PH 8.0 Elution: 20 mM sodium phosphate, 500 mM Imidazole, 500 mM NaCl, PH8.0 調(diào)整咪唑的濃度，要么峰型好，但雜帶還是很多；要么沒有特異的峰出現(xiàn)。請問各位高手有沒有好的純化方法？非常感謝 |
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shengnan1987
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