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yijunliu銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
短基因片段合成的相關(guān)問題求助
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各位蟲友，大家好。最近在做一個(gè)基因，由于沒有模板，只能去生物公司合成。我的基因片段一共69bp，加上兩端的酶切位點(diǎn)一共是81bp。咨詢過生物公司的負(fù)責(zé)人，他們說如果按照一般合成基因的程序，先把目的基因合成到質(zhì)粒里面，把質(zhì)粒寄給我們，我們?cè)龠M(jìn)行雙酶切和膠回收基因酶切片段，再與自己的質(zhì)粒酶連。對(duì)于我這樣的小片段基因不容易做。他們提出建議：這么短的基因，可以直接合成兩條長鏈，然后寄給我們，由我們自己退火，這樣的話退火后直接和酶切好的自己的質(zhì)粒連接就行了。 我想問問大家，這樣做出來的基因可以直接當(dāng)做是已經(jīng)雙酶切過的基因與我們自己已雙酶切過的質(zhì)粒酶連嗎？還有，自己退火的話，溫度，時(shí)間等條件應(yīng)該怎么判定呢。 第一次接觸這方面，請(qǐng)大家多多指導(dǎo)��！十分感謝啊�。�！ |
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yijunliu
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yijunliu
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