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baobeiqianxi鐵蟲 (初入文壇)
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分光光度計(jì)測定酶活中的問題
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分光光度計(jì)測定酶活,有空白、對照、實(shí)驗(yàn)三個(gè)待測樣品(空白是繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的空白組),若對照組、實(shí)驗(yàn)組需稀釋,空白也需要稀釋嗎? |
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轉(zhuǎn)帖一個(gè)別的論壇上看到的一個(gè)關(guān)于紫外可見分光光度法中空白的幾個(gè)概念。分光光度法中的幾個(gè)空白概念 試樣空白:顯色劑沒有顏色而試液有顏色,或者說在測量波長處,顯色劑無吸收,試液有吸收時(shí),應(yīng)采用不加顯色劑的試液作參比溶液,稱為試樣空白。 溶劑空白:當(dāng)試液、顯色劑及所作用的其他試劑在測定波長處都無吸收時(shí),可采用純?nèi)軇ㄈ缯麴s水)做參比溶液,稱為溶劑空白。 試劑空白:若顯色劑有顏色,并且在測量波長處有吸收,但試液在測量條件下沒有吸收,在這種情況下,可用不含試液而顯色劑和其他試劑都相同的溶液作參比溶液,稱為試劑空白。 褪色空白:能夠多選擇性地與有色絡(luò)合物中的被測離子作用,使絡(luò)合物破壞而褪色,然后以它作為參比溶液的一種試劑,稱為褪色空白。 我認(rèn)為的紫外可見用于定量一般是這樣的流程。 1制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(就是你說的對照) 2測樣品組,利用標(biāo)準(zhǔn)曲線根據(jù)吸光度求出待測樣濃度 3根據(jù)比例計(jì)算樣品量。 自然你標(biāo)準(zhǔn)曲線的反映體系跟樣品的反映體系應(yīng)該是相同的,空白也是一樣的,只是把你的標(biāo)準(zhǔn)品(對照品)換成空白(一般用你溶解試樣或標(biāo)準(zhǔn)品的液體,比如說你使用蒸餾水溶解樣品,那空白就是等量的蒸餾水) |
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