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western 中,目的蛋白沒有,但是Marker 暴出來了,什么原因啊
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各位蟲友: 我最近在做Western 實驗,奇怪的是,目的蛋白沒出來,Marker 和一些很大分子量的雜蛋白暴出來了,到底是什么原因? 1. 我把ECL 染液滴到二抗上,它會發(fā)光,而且有雜蛋白暴出來,說明染液和二抗也沒問題吧? 2.我在轉膜后,用立春紅對NC膜進行了染色,條帶很清晰,對轉膜后的凝膠用考馬斯亮藍進行染色,條帶很弱, 說明我的轉膜是成功的。 3.我用1:1000的比例稀釋一抗,在 4度下孵育過夜,第二天在孵育二抗,進行后續(xù)實驗。 4.在滴上顯色液后,MARKER 位置上會顯示很亮的熒光,可其余地方沒有,就讓我很奇怪。 自己初學,沒什么經驗,希望得到大家的指導,謝謝 |
分子生物學 |
金蟲 (正式寫手)

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