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xingfuxiaoyu新蟲 (初入文壇)
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[求助]
western 中，目的蛋白沒有，但是Marker 暴出來了，什么原因啊
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各位蟲友： 我最近在做Western 實(shí)驗(yàn)，奇怪的是，目的蛋白沒出來，Marker 和一些很大分子量的雜蛋白暴出來了，到底是什么原因�。� 1. 我把ECL 染液滴到二抗上，它會(huì)發(fā)光，而且有雜蛋白暴出來，說明染液和二抗也沒問題吧？ 2.我在轉(zhuǎn)膜后，用立春紅對(duì)NC膜進(jìn)行了染色，條帶很清晰，對(duì)轉(zhuǎn)膜后的凝膠用考馬斯亮藍(lán)進(jìn)行染色，條帶很弱， 說明我的轉(zhuǎn)膜是成功的。 3.我用1：1000的比例稀釋一抗，在 4度下孵育過夜，第二天在孵育二抗，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 4.在滴上顯色液后，MARKER 位置上會(huì)顯示很亮的熒光，可其余地方?jīng)]有，就讓我很奇怪。 自己初學(xué)，沒什么經(jīng)驗(yàn)，希望得到大家的指導(dǎo)，謝謝 |
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xingfuxiaoyu
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