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靜音0108銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
做雙酶切 跑膠后什么都沒有 是怎么回事？
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眾位蟲子們 幫幫忙啊 誰遇到過這種狀況 質(zhì)粒和DNA片段做雙酶切后 跑膠后什么都沒有 一片空白。用于酶切的質(zhì)粒和片段在酶切前跑膠是有條帶的 ，為何切后什么都沒了？我37℃酶切了7小時，即使是時間過長了 ，也應(yīng)該有彌散的吧？ |
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2樓2012-09-18 21:57:10
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4樓2012-09-18 23:48:57
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5樓2012-09-19 10:39:26
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| 個人感覺樓主可以從以下幾個方面來判斷一下：第一是看溴酚藍(lán)是否跑走了，如果跑走了，應(yīng)該電泳緩沖液就沒有問題；第二是加大一下上樣量，有時候酶切過后的條帶比未酶切的條帶要弱（我也碰到這樣的問題，不清楚為什么）；第三是如樓上所說，點(diǎn)上未經(jīng)酶切的質(zhì)粒和片段作為對照。如果還是跑不出來，建議樓主用自己的引物以酶切產(chǎn)物為模板做下PCR，看是否是因為片段降解的問題。希望能幫到你！ |
6樓2012-09-19 16:11:48
靜音0108
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7樓2012-09-20 15:55:38
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8樓2012-09-20 15:56:10
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10樓2012-09-20 16:00:45
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